Горького методические рекомендации по биохимии для самостоятельной работы студентов медицинского факультета, обучающихся по кредитно-модульной системе часть I донецк, 2011
|
|
Скачать 2.04 Mb.
|
|
^
Уметь:
Для проверки исходного уровня предлагается выполнить ряд заданий. Задания для самопроверки и самокоррекции исходного уровня. ^ -0,39; +0,22; +0,35; -0,29;+0,19. В какой последовательности будет происходить перенос протонов и электронов в системе, включающей эти соединения? А. От меньшего потенциала к большему В. От большего к меньшему С. Перенос электронов не зависит от величины потенциала D. Перенос электронов в системе не возможен Задание 2. В пробирке имеется окрашенный раствор ДХФИ. При добавлении вещества А окраска исчезает. Какими свойствами обладает вещество А? А. Восстанавливающими ( восстановленная форма ДХФИ бесцветна) В. Окислительными (окисленная форма ДХФИ бесцветна) С. Не способно окисляться Д. Является донором атомов водорода Е. Не способно восстанавливаться. Задание 3. При отсутствии в пище витамина РР развивается заболевание пеллагра. Биологическая роль этого витамина заключается в переносе протонов и электронов. Какой компонент этого витамина непосредственно участвует в присоединении водорода? А. Бензольное ядро В. Амидная группа С. Карбоксильная группа D. Пиридиновое ядро Е. Пиримидиновое ядро Правильность решения заданий проверьте, сопоставив их с эталонами ответов. ^ 1.- А, 2. –А . Информацию, необходимую для восполнения исходного уровня, можно найти в следующей литературе. 1. Тюкавкина Н.А., Бауков Ю.И. Биоорганическая химия. - М.: Медицина, 1991. – С. 213-227, 291-294, 301-304. 3.Лекции по биоорганической химии. Содержание обучения Содержание обучения должно обеспечивать достижение целей обучения, чему способствует граф логической структуры изучаемой темы (Приложение 1). Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:
^ 1. Губський Ю.Г. Біологічна хімія. - Київ-Тернопіль.: Укрмедкнига, 2000. - С. 122-1422. Тестовые задания по биологической химии/ Под ред.Б.Г.Борзенко. - Донецк, 2000. -С.44-73. 3. Лекции по биохимии. 4. Граф логической структуры (Приложение 1). 5. Инструкция к практическому занятию. Дополнительная литература 1. Маршалл В.Дж. Клиническая биохимия. - М.-С-П.: Издательство БИНОМ-Невский Диалект, 1999. – С. 66 -68. 2. Марри Р., Греннер Д., Мейес П., Родуэлл В. Биохимия человека. - М.: Мир, 1993. - С.111-139 3. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. - М.: Медицина, 1998. - С. 305-316 4. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. - М.: Медицина, 1990. - С. 213-225 5. Николаев А.Я. Биологическая химия. - М.: Высшая школа 1998, С.199-212. После изучения вышеперечисленных вопросов для самопроверки усвоения материала по изучаемой теме предлагается решить следующие целевые обучающие задачи. ^ Задача 1. Нарушение последовательности ферментов при реконструкции цепи тканевого дыхания в эксперименте полностью блокирует его активность. Каким свойством компонентов необходимо руководствоваться в построении активной цепи переноса электронов? А, Молекулярной массой В. Редокс-потенциалом С. Структурой кофакторов D. Электрофоретической подвижностью. Задача 2. Сопряжение тканевого дыхания с фосфорилированием требует наличия градиента концентрации Н+ между двумя сторонами внутренней митохондриальной мембраны. Какую роль он играет в синтезе АТФ? А. Катализирует реакцию синтеза АТФ В. Активирует АТФ-синтетазу С. Участвует в образовании промежуточных высокоэнергетических соединений Д. Способствует выделению энергии в дыхательной цепи Е. Переводит компоненты дыхательной цепи в высокоэнергетическую форму путем изменения их конформации. Задача 3. Животные содержались на рационе, лишенном некоторых витаминов. Отсутствие какого витамина приведет к нарушению активности дегидрогеназ тканевого дыхания? А. РР В. Пиридоксина С. Фолиевой кислоты D. Кобаламина Е.. Рутина Задача 4. Нарушение синтеза цитохромов у подопытных животных, в диете которых не содержалось некоторых микроэлементов, привело в торможению тканевого дыхания. Какой компонент цитохромов, активно участвующий в переносе электронов, отсутсвовал в пище? А.Гистидин глобина В. Пиррольное кольцо С. Железо гема D. Винильный радикал Е. Апофермент Задача 5. Больной доставлен в состоянии острой гипоксии после отравления угарным газом. Каков механизм действия этого газа на организм? А. Ингибирует тканевое дыхание В. Ингибирует перенос водорода С. Восстанавливает кислород Д. Ингибирует ЦТК Е. Разобщает дыхание и фосфорилирование Задача 6. У пациента после передозировки наркотиков наступила внезапная остановка сердца. Каков механизм этой патологии? А Разобщение дыхания и фосфорилирования В. Ингибирование ферментов дыхательной цепи С. Ингибирование ЦТК Д. Разрушение митохондрий Е. Ингибирование субстратного фосфорилирования. Задача 7. 2,4 – динитрофенол пытались использовать для лечения ожирения у крыс. Как обряснить случаи летального исхода у животных после применения препарата? А. Торможением синтеза АТФ В.. Ингибированием ферментов дыхательной цепи митохондрий С. Снижением потребления кислорода D. Разрушением митохондрий Е Активацией АТФ-синтетазы Правильность решения задач проверьте, сопоставив их с эталонами ответов. Эталоны ответов к решению целевых обучающих задач: 1. – В, 2. – D, 3. –А, 4. - С. Задания для самостоятельной работы І. Перепишите дыхательную цепь митохондрий (цепь переноса электронов ( ЦПЭ) SH2 ( ЦТК, β- окисление) Mатрикс NAD SH2 (сукцинат)  1/2 O2 H2OS NADH+Н +  FAD· FeS        E-FMN · FeS КoQ цит.b · FeS цит. c1 цит. c цит. aa3ІІ. Для усвоения темы необходимо уяснить, что:
Задание 1. Напишите схему дыхательной цепи для субстратов пиридинзависимых дегидрогеназ (малат, α-кетоглутарат, изоцитрат). Укажите коэффициент фосфорилирования и пункты сопряжения. Задание 2. Напишите схему дыхательной цепи для субстратов ФАД-зависимых дегидрогеназ. Укажите коэффициент фосфорилирования. Сколько АТФ будет синтезироваться при окислении 5 моль сукцината. ІІІ. Укажите на дыхательной цепи места действия ингибиторов дыхания и назовите их. ІУ. Вопрос: Как изменится потребление кислорода митохондриями при интенсивной физической работе? Вопрос: Как регулируется температура тела при изменении температуры окружающей среды? ^ На занятии проводится тестовый контроль исходного уровня знаний студентов и его коррекция. Проверяется выполнение домашнего задания. Затем студенты приступают к выполнению лабораторной работы, используя при этом инструкцию. После выполнения лабораторной работы необходимо оформить протокол,сделать выводы к работе, которые проверяет и контролирует преподаватель.Проводится итоговый тестовый контроль по теме, подводятся итоги работы. ^ ^ Изучение активности малатдегидрогеназы» Принцип метода: малатдегидрогеназа окисляет яблочную кислоту. В качестве конечного акцептора атомов водорода используется 2,6-дихлорфенолиндофенол (2,6-ДХФИ). Если фермент активен, то окраска ослабевает. ^ фосфатный буфер рН=7,4, раствор яблочной кислоты, раствор 2.6 –ДХФИ, суспензия митохондрий, пипетки, пробирки. Ход работы: Работу выполняют в 2-х пробирках (контроль и опыт) в соответствиии со схемой постановки: Содержимое пробирок Контроль Опыт 1. Фосфатный буфер рН=7,4 1,0 мл 1,0 мл 2. Раствор яблочной кислоты (малат) 0,5 0,5 3. Раствор 2,6-ДХФИ 0,5 0,5 4. Суспензия митохондрий - 0,5 5. Прокипяченная суспензия митохондрий 0,5 - Инкубация при комнатной температуре10 минут. Результаты (окраска). ВЫВОДЫ: РАБОТА №2. Изучение активности сукцинатдегидрогеназы Принцип метода: Сукцинатдегидрогеназа окисляет янтарную кислоту. Конечным акцептором ионов водорода служит 2,6-ДХФИ. Если фермент активен, окраска исчезает. ^ буферный раствор рН=7,4, сукцинат, раствор 2.6 –ДХФИ, суспензия митохондрий, пипетки, пробирки. Ход работы: Работу выполняют в 2-х пробирках (контроль и опыт) в соответствиии со схемой постановки: Содержимое пробирок Контроль Опыт 1. Буферный раствор рН=7,4 1,0 мл 1,0 мл 2. Сукцинат 0,5 0,5 3. Раствор 2,6-ДХФИ 0,5 0,5 4. Суспензия митохондрий - 0,5 5.Прокипяченная суспензия митохондрий 0,5 - _____________________________________________________________________________ Инкубация при комнатной температуре 10 минут. Результаты (окраска). ВЫВОДЫ: РАБОТА № 3. Изучение реакций окислительного фосфорилирования Принцип метода При окислении различных субстратов в дыхательной цепи высвобождается энергия, часть которой используется на реакцию фосфорилирования АДФ неорганическим фосфатом: АДФ + Н3РО4 + энергия = АТФ + Н2О. Степень окислительного фосфорилирования (энергетическая ценность субстратов) определяется по убыли неорганического фосфата (коэффициент Р/О =1- 3). Используя различные субстраты (яблочная, янтарная, аскорбиновая кислоты) определить степень окислительного фосфорилирования. Содержание фосфорной кислоты определяют в реакции с молибдатом аммония и редуцирующим раствором аскорбиновой кислоты по интенсивности окраски образующейся молибденовой сини. ^ инкубационная смесь, физиологический раствор, раствор яблочной кислоты, раствор янтарной кислоты, раствор аскорбиновой кислоты, суспензия митохондрий, раствор ТХУ, раствор молибдата аммония, редуцирующий раствор Фиске и Субарроу, пипетки, пробирки. ^ Работу выполняют в 4-х пробирках (контроль и 3 опыт) в соответствиии со схемой постановки: Содержимое пробирок Контроль О п ы т ________________________________ 1 2 3 1. Инкубационная смесь 1,0 1,0 1,0 1,0 2. Физиологический раствор 0,5 - - - 3. Раствор яблочной кислоты - 0,5 - - 4. Раствор янтарной кислоты - - 0,5 5. Раствор аскорбиновой кислоты - - - 0,5 6. Суспензия митохондрий 0,5 0,5 0,5 0,5 Инкубация 10 минут при комнатной температуре, затем добавляем: 7. Раствор трихлоруксусной кислоты (ТХУ)1,0 1,0 1,0 1,0 8. Раствор молибдата аммония 0,5 0,5 0,5 0,5 9. Редуцирующий раствор Фиске и Субарроу 0,5 0,5 0,5 0,5 Инкубация 10 минут. Результаты (интенсивность окраски по четырехбальной шкале). Коэффициент Р/О ВЫВОДЫ: РАБОТА №4 Изучение влияния 2,4-динитрофенола (2,4-ДНФ) на окислительное фосфорилирование. Принцип метода: 2,4-ДНФ является разобщителем фосфорилирования сопряженного с окислением. Об окислительном фосфорилировании судят по убыли в инкубационной среде неорганического фосфата, который определяется, как описано в работе №3. ^ аствор яблочной кислоты, раствор 2.4 ДНФ, суспензия митохондрий, раствор ТХУ, раствор молибдата аммония, редуцирующий раствор, пипетки, пробирки. Ход работы: Работу выполняют в 2-х пробирках (контроль и опыт) в соответствиии со схемой постановки: Содержимое пробирок Контроль Опыт 1.Раствор яблочной кислоты 0,5 0,5 2.Раствор 2,4-ДНФ - 0,5 3.Суспензия митохондрий 0,5 0,5 Инкубация 10 минут при комнатной температуре. 4.Раствор Т Х У 1,0 1,0 5.Раствор молибдата аммония 0,5 0,5 6.Редуцирующий раствор 0,5 0,5 Результаты: (интенсивность окраски). ВЫВОДЫ: Подпись преподавателя: Приложение 1 Г р а ф логической структуры ТКАНЕВОЕ ДЫХАНИЕ  ^ ЦЕПИ В МИТОХОНДРИЯХ  ЦИТОХРОМЫДЕГИДРОГЕНАЗЫ   ^  ВЫДЕЛЕНИЕ ЭНЕРГИИ И СОПРЯЖЕНИЕ ДЫХАНИЯ С ФОСФОРИЛИРОВАНИЕМ       ^ МЕХАНИЗМ ОКИСЛИТЕЛЬНОГО ФОСФОРИЛИРОВАНИЯ ОБРАЗОВАНИЕ ТЕПЛА РЕГУЛЯЦИЯ ОФ, ДЫХАТЕЛЬНЫЙ КОНТРОЛЬ  ^ ИНГИБИТОРЫ И РАЗОБЩИТЕЛИ ОКИСЛИТЕЛЬНОГО ФОСФОРИЛИРОВАНИЯ - - СВОБОДНОЕ НЕ- ФОСФОРИЛИРУЮ- ^    ^ ТЕМА 1.7. ОБМЕН ВЕЩЕСТВ И ЭНЕРГИИ. ИССЛЕДОВАНИЕ ФУНКЦИОНИРОВАНИЯ ЦИКЛА ТРИКАРБОНОВЫХ КИСЛОТ Актуальность темы Цикл трикарбоновых кислот - это общий конечный путь для окисления ацетильных групп, в которые превращается в процессе катаболизма большая часть органических молекул, играющих роль клеточного топлива - углеводов, жирных кислот и аминокислот. Ферментативное окисление ацетильных групп в ЦТК сопровождается образованием высокоэнергетических атомов водорода и высвобождением углекислого газа. Протоны водорода и богатые энергией электроны передаются по дыхательной цепи с выделением большого количества энергии, запасаемой в форме АТФ. Врач, говоря о дыхании, должен иметь в виду не только его физиологический аспект, но и молекулярные механизмы процесса потребления кислорода и образования углекислого газа в клетках. Эти знания помогут осмыслить многие разделы патфизиологии, фармакологии, эндокринологии, терапии, касающиеся биоэнергетики и ее регуляции. Нарушения энергетического обмена лежат в основе патогенеза многих заболеваний. Теперь ознакомьтесь с целями занятия. ^ � По результатам реакций, определяющих конечные продукты ЦТК, интерпретировать механизм функционирования ЦТК для оценки энергетического обеспечения организма в норме и при нарушении обмена веществ. ^ Уметь:
^ Задания для самопроверки и самокоррекции исходного уровня |
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям