Учебно-методическое пособие Минск бгму 2010 удк
Скачать
1.83 Mb.
Название
Учебно-методическое пособие Минск бгму 2010 удк
Количество страниц
10
Ж. Г. Шабан
Дата
25.03.2013
Размер
1.83 Mb.
Тип
Документы
Содержание
Методы исследования в микробиологии
Список сокращений
Техника безопасности
Биологическая безопасность –
Уровень биобезопасности
Уровень биобез
Agrobacterium radiobacter
Bacillus subtilis
Bacillus anthracis
Забор, хранение и транспортировка материала
При работе с кровью следует строго соблюдать рекомендации по предотвращению заражения ВИЧ и парентеральными вирусными гепатитами
У девочек
Особенности взятия материала при подозрении на анаэробную инфекцию.
Организация проведения микробиологического исследования.
Забор материала в кабинете врача, принимающего больного.
Забор материала
Микроскопический (бактериоскопический)
Этапы БСМИ
Методы окраски мазков
2) сложные
Структура бактерий
Клеточная стенка
3 этап БСМИ. Микроскопия
Светлопольная микроскопия
Темнопольная микроскопия (ТПМ)
Рис. 5. Treponema
Фазовый объектив
Фазовый конденсор
В зависимости от способа получения фазовых колец различают 2 типа фазового контраста
Рис. 7. Фазово-контрастная микроскопия Bacillus
Люминесцентная микроскопия.
Электронная микроскопия (ЭМ)
Таблица 3 Сравнение электронного и светового микроскопов
Таблица 4 Схема микроскопического метода исследования
Культивирование микроорганизмов
Требования к питательным средам.
Классификации питательных сред
Классификационный признак
Цель использования
I. По происхождению
II. По составу
IV. По назначению
Таблица 6 Наиболее часто используемые индикаторы рН в питательных средах
Название индикатора
Бромтимоловый синий
ВР (водный голубой+розоловая кислота)
Феноловый красный
V. По цели использования
Приготовление питательных сред.
Рост бактерий в жидких питательных средах.
Признаки колоний
Staphylococcus aureus
Escherichia coli
Стадии (фазы) роста бактериальной культуры на питательной среде
A – фаза задержки роста (начальная стационарная)
B – короткий период положительного ускорения
D – фаза замедления скорости роста (отрицательного ускорения)
E – стационарная фаза
Управляемое культивирование микроорганизмов.
Методы выделения чистых культур аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов
II. Метод заражения чувствительных лабораторных животных (биологический)
III. Методы, основанные на избирательной чувствительности микроорганизмов к воздействию внешних факторов
Методы выделения чистых культур облигатно-анаэробных микроорганизмов
Особенности выделения и культивирования анаэробов.
Исторические методы выделения анаэробов, некогда применявшиеся в практике анаэробной диагностики
Культуральный (бактериологический) метод исследования
БЛМИ включает несколько этапов
Состав среды Клиглера
Таблица 8 Признаки, учитываемые при идентификации микроорганизмов (критерии вида)
II. Этапы БЛМИ при выделении чистой культуры облигатных анаэробов.
Процедура алкогольного шока: в
Процедура теплового шока
Таблица 9 Схема бактериологического метода исследования
изучение мофотипов колоний
и сследование свойств чувствительных к кислороду культур
выдача заключения
Биохимическая идентификация микроорганизмов
Таблица 10 Определение биохимических свойств микроорганизмов
Сахаролитические ферменты
Продукция ацетил-метил-карбинола
Протеолитические ферменты
Proteus vulgaris
Дезами-назы амино-кислот
Десуль-фуразы (цисти-назы)
Липолитические ферменты
Окислительно-восстановительные ферменты (овф)
Фибри- нолизин
Летучие жирные кислоты
Валериановая кислота
Схема идентификации с использованием таких тест-систем включает следующие этапы
Идентификация микроорганизмов
А. Генетический.
В. Серологический.
Принципы молекулярно-генетического анализа
Сферы использования молекулярно-генетических методов в микробиологии
Материал для молекулярно-генетических исследований.
Таблица 11 Классификация молекулярно-генетических методов
Таблица 12 Примеры некоторых рестриктаз и их рестрикционных сайтов
Методы, основанные на гибридизации нуклеиновых кислот.
На мембранах.
Этапы реакции гибридизации на мембранах
III. Методы, основанные на амплификации нуклеиновых кислот.
Принцип ПЦР.
Постановка ПЦР
Termophilus aquaticus
25–40 циклов
Таблица 14 Анализ результатов ПЦР
Модификации ПЦР
IV. Методы анализа амплифицированных фрагментов.
V. Методы, основанные на определении последовательности нуклеотидов в ДНК, РНК и аминокислот в белках.
Очистка амплифицированных фрагментов ДНК.
Кодоны 507 508 509 510 511 512 513 514 515 516 517 518 519 520 521 522 523 524 525 526 527 528 529
Биоанализ первичной структуры ДНК
Другие варианты секвенирования.
Микрожидкостное секвенирование по Сенджеру.
VI. Методы, основанные на модификации генетической информации.
Постановка опыта конъюгации.
Таблица 15 Характеристика штаммов E. сoli, участсвующих в процессе конъюгации
4. Сайт-специфический мутагенез.
5. Методы селекции мутантов.
А рост тест-микроорганизмов на простой среде
Оценка молекулярно-генетических методов.
Высокая чувствительность.
Mycobacterium leprae
4. Возможность использования для экспресс-диагностики.
5. Возможность полной автоматизации и в
6. Низкая вероятность инфицирования персонала в процессе проведения исследований.
2. Необходимость разработки новых подходов к клинической интерпретации получаемых результатов.
3. Высокая стоимость оборудования.
Определение факторов патогенности бактерий
3. Гены, кодирующие бактериальные гликаны
4. Поверхностные структуры клеточной стенки
7. Изучение неизвестных токсинов и других факторов патогенности микроорганизмов, механизмы действия которых недостаточно изучены
8. Определение ферментов обмена веществ и ферментов-токсинов
10. Для выявления протективных антигенов
Методы изучения
Критерий метода
Быстрота получения результатов
Основные понятия
Показания к определению чувствительности микроорганизмов к антибиотикам
Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам нецелесообразно
Выбор антибиотиков, подлежащих тестированию.
Этапы тестирования чувствительности микроорганизмов к антибиотикам.
Дискодиффузионный метод
Метод разведений в агаре
Метод разведений в жидких средах
Е-тест (эпсилометрический метод)
Ускоренный метод
Генетические методы
Факторы, влияющие на результаты определения антибиотикорезистентности
Причины несовпадений результатов определения активности препарата in vitro и его клинической эффективностью в лечении пациентов
Некоторые резистентные формы микроорганизмов, получающие эпидемическое распространение.
Биологический (экспериментальный) метод исследования
Этапы ЭСМИ.
2 этап ЭСМИ. Выбор и заражение лабораторного животного.
Нелинейные животные.
Линейные животные.
Животные-гнотобионты и животные-гнотофоры.
Ход вскрытия
4этап ЭСМИ. Идентификация
Таблица 17 Схема экспериментального метода исследования
Общие принципы
Основные понятия.
Задачи СЛМИ
Материал для серологического исследования
II. Недостатки СЛМИ
Причины ЛПР
Двухфазные протекают в 2 фазы.
Б. Неспецифическая фаза
Общие принципы
II этап АЛМИ. Постановка кожно-аллергических проб
Капельные пробы
Скарификационные пробы
Внутрикожные тесты
III этап АЛМИ. Постановка провокационных проб
IV этап АЛМИ. Постановка элиминационных тестов.
V этап АЛМИ. Лабораторные методы
Оценка АЛМИ.
II. Недостатки АЛМИ
Электронные источники научной информации
Разместите кнопку на своём сайте:
Медицина
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo
,
dekanat
, ansya, kenam
обратиться к администрации
|
правообладателям
|
пользователям
Новые материалы
опубликовать
Документы