Учебно-методическое пособие Минск бгму 2010 удк

Некоторые резистентные формы микроорганизмов, получающие эпидемическое распространение.

Антибиотикорезистентные S. pneumoniae (АРП) - пневмококки, резистентные к антибактериальным препаратам трех и более классов (например, к пенициллину, ко-тримоксазолу и макролидам).

Бактерии, продуцирующие β-лактамазы расширенного спектра действия (БЛРС), способны инактивировать β-лактамные антибиотики различных классов, включая пенициллины и цефалоспорины I-IV поколений, кроме цефамицинов (цефокситин, цефотетан) и карбапенемов.

Бактерии, продуцирующие β-лактамазы широкого спектра действия, способны инактивировать пенициллины, включая аминопенициллины (ампициллин, амоксициллин), антисинегнойные пенициллины (карбенициллин, пиперациллин и др.), цефалоспорины I и отчасти II (цефаклор) поколений.

Ванкомицинорезистентные энтерококки (VRE) – Enterococcus spp. для которых МИК для ванкомицина составляет 32 мг/л и более.

Метициллинорезистентный S. aureus (MRSA) – S. aureus, резистентные к метициллину (оксациллину), которые содержат ген mecA, обусловливающий продукцию измененного пенициллинсвязывающего белка  ПСБ-2. ПСБ-2 плохо связывает β-лактамные антиботики и они не транспортируются в бактерии. MRSA устойчивы ко всем β-лактамным антибиотикам и обычно резистентны к антибиотикам других классов, поэтому их называют «множественно-резистентные стафилококки».

S.aureus с промежуточной резистентностью к ванкомицину или S.aureus с промежуточной резистентностью к гликопептидам – S.aureus, которые характеризуются значениями МИК ванкомицина 8–16 мг/л.

1. 
   Выделение и идентификация чистой культуры микроорганизмов, если её невозможно получить на питательных средах:
   

2. 
   Определение вирулентности и патогенности микроорганизмов.
   
3. 
   Индикация и идентификация экзотоксинов.
   
4. 
   Изучение патогенеза инфекционных болезней при воспроизведении экспериментальных инфекций.
   
5. 
   Производство биологических препаратов (профилактических, диагностических и лечебных сывороток, вакцин, культур тканей).
   
6. 
   Проверка безвредности и эффективности лечебных препаратов (химиопрепаратов, иммунопрепаратов).
   
7. 
   Лабораторные животные служат донорами крови для приготовления кровяных питательных сред и проведения исследований, связанных с использованием крови и её ингредиентов.
   

• 
  выщипывают или выстригают (выбривают) шерсть;
  
• 
  удаляют остатки шерсти депилятором;
  
• 
  участок кожи подвергают антисептической обработке одним из способов (спиртом, спиртом в смеси с эфиром 1:1, 10% настойкой йода).
  

• 
  Вид лабораторного животного.
  
• 
  Цель заражения.
  
• 
  Время заражения.
  
• 
  Материал, примененный для заражения.
  
• 
  Изменение поведенческих реакций животного после заражения.
  
• 
  Время гибели (умерщвления) животного.
  
• 
  Изменения, обнаруженные при вскрытии.
  
• 
  Материал, взятый для посева.
  
• 
  Свойства микроорганизма.
  
• 
  Вид микроорганизма.
  

• 
  относительно высокая чувствительность;
  
• 
  высокая специфичность;
  
• 
  ранний метод исследования.
  

• 
  длительность;
  
• 
  не всегда доступен;
  
• 
  опасность инфицирования;
  
• 
  дорогостоящий.
  

1. 
   серодиагностика инфекционных заболеваний, основанная на обнаружении в сыворотке Ат; диагностическое значение имеют:
   

2. 
   серодиагностика аутоиммунных заболеваний и аллергических реакции немедленного типа, основанная на обнаружении в сыворотке Ат;
   
3. 
   серодиагностика заболеваний, основанная на обнаружении Аг в биологических жидкостях или тканях:
   

4. 
   определение активности гуморального поствакцинального индивидуального или коллективного иммунитета;
   
5. 
   определение титров диагностических, лечебных и профилактических сывороток;
   
6. 
   определение групп крови, подбор доноров при пересадке органов, определение гормонов (щитовидной железы, половых);
   
7. 
   определение фальсификации пищевых продуктов, судмедэкспертиза на основании определения видовой принадлежности антигенов.
   

1. 
   сыворотки, полученные из венозной крови, взятой в утреннее время, натощак (между последним приемом пищи и взятием крови должно пройти не менее 12 часов). За сутки до взятия крови необходимо исключить жирную пищу и прием алкоголя, за 1 час – курение. Необходимо исключить повышенные психоэмоциональные и физические нагрузки;
   
2. 
   чистые культуры микроорганизмов, выделенные от больных или из объектов внешней среды;
   
3. 
   патологический материал от больных (например, соскобы эпителия, пунктаты, биоптаты, секционный материал) для экспресс-обнаружения Аг микроорганизмов.
   

1. 
   высокая специфичность определяется способностью Аг взаимодействовать только с гомологичными Ат. Самая низкая специфичность – у РА.
   
2. 
   чувствительность – минимальное количество Аг или Ат, которое выявляет реакция; хотя чувствительность зависит от метода исследования: минимальная – у РА (выявляет 100 мг Ат в 1 л), максимальная – у ИФА и РИА (выявляют до 0,00001 мг Ат в 1 л). В целом чувствительность достаточно высокая, но не абсолютная (95–98% в самых чувствительных реакциях).
   
3. 
   ранний метод исследования при выявлении Аг, как микробных (обычно в РИФ), так и опухолеассоциированных (обычно в ИФА).
   
4. 
   возможность проведения ретроспективных эпидемиологических исследований на основании обнаружения Ат. Ат циркулируют в организме относительно долго после контакта организма с возбудителем. Это особенно важно при ретроспективной диагностике субклинических форм заболеваний.
   
5. 
   быстрота получения результатов. Скорость получения результатов зависит от используемой реакции. Так, при постановке РА на стекле результат может быть получен через 5 минут, при постановке РПГА – через 2 часа, РСК, ИФА, РИА – через 4 часа, РП в геле – через 24 часа.
   

1. 
   поздний метод исследования при выявлении Ат: при острых инфекционных заболеваниях обнаружение Ат часто бывает ретроспективным потому, что Ат обычно появляются не ранее 7 дня от начала заболевания, а к этому времени острое заболевание может закончиться.
   
2. 
   наличие ложных результатов:
   

3. 
   потенциальная опасность инфицирования всегда существует при работе с биологическим материалом.
   

1. 
   Ставятся in vitro, за исключением анафилаксии.
   
2. 
   Проявляются при иммунологическом соответствии (гомологичности) Аг и Ат и присутствии их в эквивалентных соотношениях (недостаток или избыток компонентов препятствует образованию иммунных комплексов). Протекают в оптимальных температурных условиях (0–37⁰С) и рН среды, только в присутствии электролита (0,85% раствор NaCl).
   
3. 
   Различают двухфазные и однофазные серологические реакции.
   

1. 
   сорбция одного компонента реакции (Аг или Ат) на носителе. В качестве носителя антигенов могут быть использованы эритроциты – РПГА или частицы латекса – РПЛА;
   
2. 
   использование гемолитической системы, состоящей из равных объёмов Аг и Ат, для определения комплементсвязывающих антител в РСК;
   
3. 
   использование флюорохромов – РИФ;
   
4. 
   использование ферментов (пероксидаза, β-глюкуронидаза) – ИФА;
   
5. 
   комбинированное применение различных принципов и реакций: после электрофоретического разделения белков исследуемого образца электрофореграмма переносится на нитроцеллюлозную пластинку и далее обрабатывается как в ИФА – иммуноблотинг;
   
6. 
   использование радиоактивных изотопов (йод, хром) – РИА;
   
7. 
   использование электронов или морфологически различимых частиц: золота, осмия, ферритина (белка селезенки), гемоцианина (белка гемолимфы молюска), небольших вирусов при иммунной электронной микроскопии и в иммуногистохимических исследованиях. Ат, присоединенные к электронам или морфологически различимым частицам становятся видимыми в электронном микроскопе как небольшие плотные точки;
   
8. 
   использование системы биотин-авидин в тест-системах ИФА 4-го проколения для скрининга ВИЧ-инфекции. Биотином метят моноклональные Ат к Аг ВИЧ. Молекулы авидина (гликопротеина яичного белка) обладают высоким сродством к небольшим молекулам витамина биотина (молекула авидина связывает 4 молекулы биотина). Поэтому Ат, конъюгированные с биотином, обнаруживают по взаимодействию с авидином;
   
9. 
   ингибирование специфическими Ат феномена гемагглютинации (склеивания эритроцитов гемагглютининами вируса) – РТГА;
   
10. 
    ингибирование специфическими Ат феномена гемадсорбции (способности вирусов, имеющих гемагглютинины, адсорбировать эритроциты) – РТГАдс;
    
11. 
    нейтрализации вирусной активности специфическими Ат в культуре клеток или на лабораторных животных – РН. В случае гомологичности Ат и вирусных Аг культура клеток (или лабораторное животное) сохраняет жизнеспособность.
    

4. 
   Все серологические реакции отличаются по проявлениям (регистрируемому эффекту) и технике постановки.