Пособие для врачей Иркутск, 2010 удк 616. 3-074 icon

Пособие для врачей Иркутск, 2010 удк 616. 3-074





Скачать 0.77 Mb.
Название Пособие для врачей Иркутск, 2010 удк 616. 3-074
страница 5/6
Дата конвертации 20.03.2013
Размер 0.77 Mb.
Тип Документы
1   2   3   4   5   6
^
Иммуноферментный анализ крови при заболеваниях ЖКТ


Большое значение в практике дифференциальной диагностики заболеваний ПС имеют в настоящее время иммунологические методы исследования, в частности, иммуноферментный анализ (ИФА) сыворотки и других биологических жидкостей организма. Его можно отнести по типу исследования и сбору биологического материала к биохимическому анализу.

В отличие от ИФА сыворотки крови, ИФА кала будет требовать определенной процедуры сбора биологического материала, рекомендованной в инструкции к тест-системе.

^ Основные компоненты ИФА: аналит – определяемое вещество (антиген или антитело); лиганд – вещество, избирательно связывающееся с аналитом (антиген или антитело); метка – легкоопределяемое соединение, добавляемое в аналитическую систему для измерения количества аналита.

^ Преимущества ИФА: высокая чувствительность, позволяющая определять концентрации до 0,05 нг/мл, минимальные объемы исследуемого материала, стабильность при хранении всех ингредиентов, простота проведения реакции, наличие как инструментального, так и визуального учета, возможность автоматизации всех этапов реакции, относительно низкая стоимостью диагностических наборов.

Рентабельность выполнения исследований методом ИФА должна рассматриваться как организационный момент, который не имеет отношения к эффективности и специфичности метода, о котором идет речь.

При выборе фирмы-поставщика цена не должна быть приоритетом. Желательно наличие в комплектации тест-систем 1-3 уровнями контроля качества, совместимость с международными контрольными материалами, стабильность реагентов после открытия набора. Естественно, необходимо уделять особое внимание срокам годности наборов.

^ Условия для проведения ИФА:

  • Материал для исследования - сыворотка крови.

  • Тестированию подлежит сыворотка, не содержащая примеси эритроцитов, бактериальной контаминации, хилеза, гемолиза. При наличии любого из указанных признаков сыворотка уничтожается и назначается повторный забор крови.

^ Приготовление сыворотки.

  • Венозная кровь берется без антикоагулянта. Отстаивается при комнатной температуре (15-20 °С) в течение 30 минут до полного образования сгустка. По окончании образования сгустка пробирки открывают и осторожно проводят тонкой стеклянной палочкой по внутренним стенкам пробирки для отделения сгустка от стенок пробирки. Сыворотку сливают в другую центрифужную пробирку, придерживая сгусток стеклянной палочкой, и центрифугируют, либо центрифугируют в тех же первичных пробирках.

  • После центрифугирования отделяют сыворотку от сгустка и клеток крови и помещают в холодильник при +2 – +8 °С. При необходимости более длительного хранения ее необходимо хранить при -20 °С. Допускается замораживать сыворотку только 1 раз.

^ Условия транспортировки.

  • Правильно собранная сыворотка должна быть своевременно доставлена в лабораторию. Сыворотка крови стабильна при +2 - +8 °С в течение 12 часов.

  • Во время транспортировки пробирки с сывороткой должны быть соответствующим образом защищены от вредного воздействия окружающей среды и погодных условий. Пробирки должны быть промаркированы, упакованы и плотно закрыты.

  • Минимальное количество сыворотки, необходимое на 1 исследование - 200 мкл.

  • Для определения динамики антителообразования сыворотку пациента исследуют дважды.

  • Интервал между исследованиями 1-2 недели (метод "парных" сывороток).

Иммуноблоттинг (иммуноблот) – высокоспецифичный и высокочувствительный референтный метод, подтверждающий диагноз для пациентов с положительными или неопределенными результатами анализов, полученных в т.ч. при помощи РПГА или ИФА. Этот метод выявления антител к отдельным антигенам возбудителя основан на постановке ИФА на нитроцеллюлозных мембранах, на которые в виде отдельных полос нанесены специфические белки, разделенные гель-электрофорезом. Уникальность иммуноблота заключается в его высокой информативности и достоверности получаемых результатов.

Исследование гормонов, характеризующих функцию инкреторного аппарата ЖКТ и поджелудочной железы (ПЖЖ), играет важную роль в диагностике гастроэнтеропанкреатических эндокринных опухолей (ГЭПЭО). Основными ГЭПЭО являются инсулинома, гастринома (синдром Золлингера-Эллисона), глюкагонома, ВИПома (синдром Вернера-Моррисона), опухоли, обуславливающие развитие карциноидного синдрома и гормон-неактивные эндокринные опухоли (опухоли, происходящие из эндокринных клеток, но лишенных возможности секретировать тот или иной гормон).

Атрофический гастрит антрального отдела желудка, например, увеличивает риск развития рака, по сравнению с нормальной слизистой желудка, в 90 раз при снижении синтеза гастрина-17. Это в свою очередь снижает выработку внутреннего фактора и усвоение витамина В12. Оценку гастрина-17 рекомендуется проводить при получении положительного результата на наличие инфекции Helicobacter pylori (НР).

НР считается причиной хронического гастрита, нелекарственного язвенного дуоденита и этиологическим стимулом MALT- лимфомы и карценомы желудка. Желательно проведение анализа на НР методом ИФА, в котором в качестве субстрата для выработки антител тест-системы были использованы только патогенные штаммы НР. В случае использования для диагностики НР в качестве субстрата лизата всех штаммов НР есть риск получения ложноположительного ответа о патологическом состоянии слизистой желудка, вызванном инфицированием НР. Иммуноблот к НР является очень перспективным серологическим методом диагностики и позволяет профильно выявлять антитела к высокоиммуногенным и высокоспецифичным штаммам.

Для диагностики НР может быть использован и метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). ПЦР на ДНК HP – является прямым методом как для диагностики, так и для оценки эффективности эрадикации через 2 недели по окончании курса лечения. Материал для исследования – биоптат слизистой желудка.

В таблице 3 представлены гормоны ЖКТ, клетки, их продуцирующие, основное место действия и характер их действия. Эти гормоны определяются в современной лабораторной диагностике методом ИФА.

Таблица 3

Гормоны желудочно-кишечного тракта


Название

(количество аминокислот)

Клетки,

продуцирующие

пептиды

Основное

место действия

Характер действия

Гастрины:

- малый

(17 АК)

- большой

(34 АК)

Стимуляция моторики, роста слизистой оболочки, секреции HCl, пепсиногена, внутреннего фактора, секретина

Желудок

Стимуляция моторики, роста слизистой оболочки, секреции HCl, пепсиногена, внутреннего фактора, секретина

Кишечник

Стимуляция моторики и роста слизистой оболочки

ПЖЖ

Стимуляция секреции ферментов и бикарбонатов

Печень

Стимуляция выделения желчи

Секретин

(27 АК)

S-клетки желудка,

12-перстной

и тонкой

кишки

ПЖЖ

Стимуляция секреции ферментов, бикарбонатов, инсулина

Печень

Стимуляция секреции бикарбонатов и воды

Желчный пузырь

Стимуляция сокращений

Желудок

Торможение моторики и секреции гастрина и соляной кислоты

Соматостатин

(14 АК)

D-клетки островков ПЖЖ

Желудок

Торможение секреции гастрина и HCl




ПЖЖ

Торможение экзо- и эндокринных функций


Вещество P

(11 АК)

EG-клетки

Нервная ткань

Передача возбуждения, аналгезия

Желудок, кишечник

Стимуляция моторики, высвобождение гистамина, саливация

Мотилин

(22 АК)

ЕС-клетки

Желудок и кишечник

Стимуляция моторики

Холецистокинин-пептид

(22 АК)

I-клетки

ПЖЖ

Стимуляция секреции ферментов, инсулина, глюкагона, панкреатического полипептида, бикарбонатов

Желчный пузырь

Стимуляция моторики

Тонкий кишечник

Стимуляция моторики

Желудок

Стимуляция (легкая) секреции HCl и пепсиногена

Вазоактивный

интестинальный

полипептид

(28 АК)

D-,

Н-клетки

тонкой

и

толстой

кишки,

нейроны

ЦНС и

кишечника

Сосуды

Расширение

Желудок

Торможение моторики и секреции кислоты и гастрина

Кишечник

Расслабление, повышение секреции воды, электролитов, гормонов

ПЖЖ

Стимуляция секреции воды, электролитов, гормонов

Гипоталамус

Высвобождение гормонов

Метаболизм

Стимуляция липолиза и гликолиза

Гастроингибирующий

пептид

(GIP, 43 АК)

D-,

К-клетки

Желудок

Торможение секреции HCl и пепсина, ослабление моторики

ПЖЖ

Повышение секреции инсулина

Тонкий кишечник

Торможение моторики, повышение секреции воды и электролитов

Бомбезин

(14 АК)

P-клетки

ПЖЖ

Высвобождение инсулина, стимуляция эффектов секретина и панкреозимина

Желудок и кишечник

Высвобождение гастрина и холецистокинина

Нейротензин

(13 АК)

N-клетки

кишечника и

мозга

Кишечник, мозг,

тимус

Сокращение гладкой мускулатуры


Имеющиеся в арсенале лабораторной диагностики тест-системы для определения содержания гормонов при диагностике секреторной деятельности ЖКТ методом ИФА в сыворотке крови можно найти на сайте www.biochemmack.ru (названия гормонов указаны в таблице 3).

1   2   3   4   5   6

Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:

Похожие:

Пособие для врачей Иркутск, 2010 удк 616. 3-074 icon Пособие для врачей Иркутск 2010 удк 616/3-089-06: 616-0858

Пособие для врачей Иркутск, 2010 удк 616. 3-074 icon Пособие для врачей Иркутск, 2011 удк 616-005. 1-08

Пособие для врачей Иркутск, 2010 удк 616. 3-074 icon Учебное пособие Иркутск, 2008 удк 614. 2+616-07-035. 7 Ббк 51. 1(2)2+53. 45
Гоу дпо «Иркутский государственный институт усовершенствования врачей Федерального агентства по здравоохранению...
Пособие для врачей Иркутск, 2010 удк 616. 3-074 icon Пособие для врачей Иркутск, 2011 удк

Пособие для врачей Иркутск, 2010 удк 616. 3-074 icon Пособие для врачей Иркутск 2010

Пособие для врачей Иркутск, 2010 удк 616. 3-074 icon Пособие для врачей удк 616. 14-08

Пособие для врачей Иркутск, 2010 удк 616. 3-074 icon Пособие для врачей Иркутск 2010 Irkutsk State Institute of Advanced Medical Studies

Пособие для врачей Иркутск, 2010 удк 616. 3-074 icon Пособие для врачей Минск, 2006 удк 616. 8-053. 2(476)

Пособие для врачей Иркутск, 2010 удк 616. 3-074 icon Учебное пособие для врачей Минск 2005 удк 616. 71 018. 46 (075. 8)

Пособие для врачей Иркутск, 2010 удк 616. 3-074 icon Учебно-методическое пособие Ижевск 2010 удк 616-001-45

Разместите кнопку на своём сайте:
Медицина


База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
Медицина