Пособие предназначено для врачей клинической лабораторной диагностики и врачей других специальностей. Рецензенты: Доктор медицинских наук, профессор Ю. В. Котловский Доктор биологических наук, профессор И. М. Устьянцева
|
|
Скачать 1.94 Mb.
|
|
Управление качеством ПЦР-исследований Документы, регламентирующие использование методов генодиагностики инфекций Порядок проведению работ в лаборатории |
|
^
Применительно к медицинским лабораториям понятие «качество» можно сформулировать следующим образом: качество лабораторных исследований – это правильно и своевременно назначенные тесты для нуждающегося в них пациента, выполненные на достаточном аналитическом уровне с необходимой информацией для их интерпретации. ПЦР – высокотехнологический метод, требующий соблюдения строгих правил оснащения и организации работ в ПЦР-лабораториях, которые обобщены и сформулированы в нормативных документах. На основании этих документов проводится лицензирование деятельности лабораторий, занимающихся генодиагностикой.
Основные документы, регламентирующие проведение ПЦР-анализа в КДЛ следующие:
На этапе создания лаборатории для обеспечения качества ПЦР-исследований необходимы продуманные инженерно-планировочные решения, согласно «Методическим рекомендациям по проведению работ в диагностических лабораториях, использующих метод полимеразной цепной реакции. Основные положения», методическим указаниям Следует четко разграничивать ПЦР-лабораторию на "зоны" (комнаты) для каждой из стадий ПЦР-реакции. Руководствуясь этими документами, лаборатория молекулярной биологии ИДЦ разделена на следующие зоны (комнаты):
Рабочие помещения должны быть оснащены ультрафиолетовыми лампами с максимумом излучения в области 260 нм (типа ДБ-60) из расчета 2,5 Вт на 1 м3. Лампы должны быть расположены так, чтобы прямому облучению подвергались поверхности рабочих столов, оборудование и материалы, с которыми имеет контакт оператор во время проведения ПЦР-анализа. Облучение необходимо проводить в течение одного часа до начала работы и в течение одного часа после окончания работы. Все кабинеты лаборатории оснащены в полном объеме емкостями для дезинфицирующих средств. Работа должна проводиться в лабораторной одежде. В пост-ПЦР-помещение используется разовая рабочая одежда. В пре-ПЦР и пост-ПЦР-помещениях должны работать разные сотрудники, чтобы избежать переноса продуктов амплификации на одежде и кожных покровах на этап пробоподготовки и тем самым исключить ложноположительные результаты исследований. Каждое помещение и каждый сотрудник лаборатории имеет свой набор реактивов, автоматических пипеток, наконечников, пластиковой и стеклянной посуды, лабораторного оборудования, халатов и перчаток, используемых только в данном помещении и не выносящихся в другие ПЦР-помещения. Оборудование, материалы и инвентарь в каждой комнате имеют соответствующую маркировку. Пробирки и наконечники для автоматических пипеток при обработке клинических образцов, а также при внесении выделенной ДНК в реакционную пробирку используются однократно. Наконечники используются только с аэрозольным барьером и обязательной сменой при переходе от одной пробы к другой с целью предотвращения перекрестной контаминации. Во время выполнения любого вида работ с ПБА запрещается оставлять рабочее место; сливать жидкие отходы (инфицированные жидкости, исследуемый материал и т.д.) в канализацию без предварительного обеззараживания. Текущая уборка помещений проводится ежедневно влажным способом после окончания рабочего дня: в "чистой" зоне лаборатории с применением моющих средств, в "заразной" зоне – с применением дезинфектантов. В конце работы обработка рабочих мест производится дезрастворами в соответствии с требованиями действующих нормативных документов, с последующей протиркой влажными одноразовыми салфетками для снятия остатков дезинфицирующего средства. Остатки ПБА, использованная посуда, твердые отходы из "заразной" зоны лаборатории должны собираться в закрывающиеся емкости и передаваться в автоклавную или дезинфицироваться на месте. Методы и средства обеззараживания определяются в каждом отдельном случае в зависимости от ПБА и характера обеззараживаемого материала. Слив необеззараженных жидкостей в канализационную сеть запрещается. Перенос ПБА и использованной посуды для обеззараживания должен осуществляться в закрывающихся емкостях. По окончании работ медицинский персонал должен обработать руки дезинфицирующим раствором или 70% спиртом с последующим мытьем с мылом. Допускается использование кожных антисептиков в соответствии с инструкциями по применению. Клинические образцы следует хранить отдельно от реагентов. Для обработки и уборки рабочего места необходимо в каждом помещении иметь ватно-марлевые тампоны (салфетки), пинцет, дезинфицирующий и инактивирующий растворы (см. ниже). Следует отметить еще одну особенность, затрудняющую исследования ДНК и РНК, это их высокая чувствительность к нуклеазам - ферментам деградации РНК и ДНК, которые могут обнаруживаться практически везде: на кожных покровах, на предметах лабораторного оборудования, реагентах, пластике. Поэтому пластик, используемый при работе с нуклеиновыми кислотами, сертифицирован на отсутствие РНКазной и ДНКазной активности. Кроме этого, пластиковые пробирки для амплификаторов должны иметь однородные тонкие стенки (для улучшения теплопроводности и сокращения времени циклов амплификации). |
отлично
1
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям