Практикум по курсу «Биохимия» для студентов специальностей 260204 «Технология бродильных производств и виноделие» и240901 «Биотехнология» Бийск

Скачать 0.82 Mb. Название Практикум по курсу «Биохимия» для студентов специальностей 260204 «Технология бродильных производств и виноделие» и240901 «Биотехнология» Бийск страница 3/8 Дата 07.04.2013 Размер 0.82 Mb. Тип Реферат

Содержание 2.1 Лабораторная работа «Определение глюкозы с помощью реакции восстановления оксида меди в гемиоксид» Материалы и реактивы Ход работы. 2.2 Лабораторная работа «Определение содержания глюкозы в вытяжке из солода методом Хагендорна–Иенсена» Материалы и реактивы Ход работы.

2 УГЛЕВОДЫ Углеводы широко представлены в растениях и животных, где они выполняют как структурные, так и метаболические функции. В растениях в процессе фотосинтеза из углекислого газа и воды синтезируется глюкоза, которая далее запасается в виде крахмала или превращается в целлюлозу. Животные способны синтезировать ряд углеводов из жиров и белков, но большая часть углеводов поступает с пищей растительного происхождения (Приложения АД). ^ 2.1 Лабораторная работа «Определение глюкозы с помощью реакции восстановления оксида меди в гемиоксид» В основе метода лежит способность солей меди (II) в определенных условиях количественно окислять глюкозу по реакции Троммера. В реакции Троммера происходит образование как альдоновых кислот, так и гидроксида меди (II), что указывает на отсутствие количественной связи между глюкозой и гемиоксидом меди. Однако, если к реакционной смеси добавляют сегнетову соль, то образуется комплекс, в котором медь реагирует с глюкозой в стехиометрическом соотношении. Количество закиси меди (Cu2O), эквивалентное окисленной глюкозе, определяют йодометрическим методом: Эта реакция в присутствии солей щавелевой или винной кислот протекает практически до конца. Количество йода в излишке, которое не прореагировало с гемиоксидом меди, можно определить титрованием тиосульфатом натрия (индикатор – раствор крахмала) ^ Материалы и реактивы: исследуемый раствор глюкозы (1…4 мг/мл), реактив Фелинга I и II (для приготовления раствора I берут 200 г сегнетовой соли и 150 г гидроксида натрия, растворяют в дистиллированной воде до объема 1 литр; раствор II готовят из 40 г перекристаллизованного сульфата меди, растворенного в 1 литре воды), насыщенный раствор щавелевой кислоты, 0,05 моль/л раствор йода, 0,05 моль/л раствор тиосульфата натрия, 1 %-ный раствор крахмала. Оборудование: стеклянные палочки, пипетки, конические колбы (объем 50 мл), капельницы, водяная баня, бюретки, часы. ^ Ход работы. В две колбы помещают по 5 мл реактива Фелинга I и II. В одну из колб (проба) добавляют 10 мл исследуемого раствора глюкозы, а в другую (контроль) – 10 мл дистиллированной воды. Содержимое обеих колб нагревают до кипения, кипятят 5 мин и затем охлаждают. После этого в обе колбы наливают по 10 мл насыщенного раствора щавелевой кислоты, по 10 мл йода и после перемешивания отстаивают в течение 5 мин. По истечении этого времени в колбы вносят по пять капель раствора крахмала и титруют раствором тиосульфата до исчезновения окраски, образовавшейся после добавления крахмала. Массовую концентрацию глюкозы в исследуемом растворе (мг/мл) рассчитывают по формуле: , где А и В – объемы раствора тиосульфата натрия, затраченные на титрование пробы и контроля соответственно; f – коэффициент поправки на титр 0,05 моль/л раствора тиосульфата натрия; Q – масса глюкозы (3,52 мг), эквивалентная 1 мл 0,05 моль/л раствора тиосульфата натрия; V0 – общий объем пробы; V1 – объем исследуемого раствора, взятый до анализа. ^ 2.2 Лабораторная работа «Определение содержания глюкозы в вытяжке из солода методом Хагендорна–Иенсена» Метод основан на способности глюкозы в безбелковой вытяжке в щелочной среде при нагревании восстанавливать красную кровяную соль (гексацианоферрат калия (III) – K3Fe(CN)6) в желтую кровяную соль (гексацианоферрат калия (II) – K4Fe(CN)6). Уравнение реакции имеет вид: Вследствие обратимости этой реакции гексацианоферрат калия (III) под действием сульфата цинка переводят в нерастворимую соль – цинкгексацианоферрат калия (III): Гексацианоферрат калия (III) берут в избытке и неиспользованный в реакции его остаток определяют йодометрически в кислой среде (например, в присутствии уксусной кислоты), титруя количество образовавшегося йода тиосульфатом натрия В качестве индикатора на молекулярный йод используют крахмал. Содержание глюкозы рассчитывают по специальной таблице 5, которая составлена так, что в ней определенному объему тиосульфата натрия, затраченного на титрование йода, а, следовательно, избытка гексацианоферрата калия (III), соответствует то число миллиграммов глюкозы, которое прореагировало в реакции. Таблица 5 – Зависимость содержания глюкозы от объема титранта Объем тиосульфата натрия, мл 0,00 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09 0,0 0,385 0,382 0,379 0,376 0,373 0,370 0,367 0,364 0,361 0,358 0,1 0,355 0,352 0,350 0,348 0,345 0,343 0,341 0,338 0,336 0,333 0,2 0,331 0,329 0,327 0,325 0,323 0,321 0,318 0,316 0,314 0,312 0,3 0,310 0,308 0,306 0,304 0,302 0,300 0,298 0,296 0,294 0,292 0,4 0,290 0,288 0,286 0,284 0,282 0,280 0,278 0,276 0,274 0,272 0,5 0,270 0,268 0,266 0,264 0,262 0,260 0,259 0,257 0,255 0,253 0,6 0,251 0,249 0,247 0,245 0,243 0,241 0,240 0,238 0,236 0,234 0,7 0,232 0,230 0,228 0,226 0,224 0,222 0,221 0,219 0,217 0,215 0,8 0,213 0,211 0,209 0,208 0,206 0,204 0,202 0,200 0,199 0,197 0,9 0,195 0,193 0,191 0,190 0,188 0,186 0,184 0,182 0,181 0,179 1,0 0,177 0,175 0,173 0,172 0,170 0,168 0,166 0,164 0,163 0,161 1,1 0,159 0,157 0,155 0,154 0,152 0,150 0,148 0,146 0,145 0,143 1,2 0,131 0,139 0,138 0,136 0,134 0,132 0,131 0,129 0,127 0,125 1,3 0,124 0,122 0,120 0,119 0,117 0,115 0,113 0,111 0,110 0,108 1,4 0,106 0,104 0,102 0,101 0,099 0,098 0,097 0,095 0,093 0,092 1,5 0,088 0,086 0,084 0,083 0,081 0,079 0,077 0,075 0,074 0,072 1,6 0,070 0,068 0,066 0,065 0,063 0,061 0,059 0,057 0,056 0,054 1,7 0,052 0,050 0,048 0,047 0,045 0,043 0,041 0,039 0,038 0,036 1,8 0,034 0,032 0,031 0,029 0,027 0,025 0,024 0,022 0,021 0,019 1,9 0,017 0,015 0,014 0,012 0,010 0,008 0,006 0,005 0,003 0,002 ^ Материалы и реактивы: вата гигроскопическая для фильтрования растворов, вытяжка из солода, 0,1 моль/л раствор гидроксида калия, 0,45 %-ный раствор сульфата цинка, щелочной раствор гексацианоферрата калия (III) (1,65 г K3Fe(CN)6 и 10,6 г безводного карбоната натрия растворяют в дистиллированной воде до объема 1 л), раствор сульфата цинка в растворе хлорида натрия(10 г сульфата цинка и 50 г хлорида натрия растворяют в дистиллированной воде и доводят объем до 200 мл), раствор иодида калия (5 г иодида калия растворяют в 25 мл дистиллированной воды), 0,05 моль/л раствор тиосульфата, 3 %-ный раствор уксусной кислоты, 1 %-ный раствор крахмала. Оборудование: стеклянные палочки, пробирки, колбы конические (объем 50 мл), воронки стеклянные, пипетки, капельницы, водяная баня, бюретки, штатив для пробирок, чашки, часы. ^ Ход работы. В две пробирки помещают по 1 мл раствора гидроксида калия. В одну из них (проба) добавляют также 0,1 мл вытяжек, а в другую (контроль) 0,1 мл дистиллированной воды. Затем вносят по 5 мл 0,45 %-ного раствора сульфата цинка и после перемешивания ставят на 23 минуты на кипящую водяную баню. После этого смесь фильтруют в конической колбе через ватный тампон, вложенный в воронку. Воронку и ватный тампон промывают горячей дистиллированной водой три раза по 2 мл, не наливая новой порции воды до полного оттока предыдущей. К фильтрату в каждой колбе приливают 2 мл щелочного раствора гексацианоферрата калия (III), и смеси кипятят на водяной бане в течение 15 мин. В каждую колбу добавляют по 2,6 мл раствора сульфата цинка в растворе хлорида натрия, по 0,4 мл раствора иодида калия и, после перемешивания, по 2 мл раствора уксусной кислоты и по три капли раствора крахмала. Смесь титруют 0,05 моль/л раствором тиосульфата натрия до исчезновения окраски, образовавшейся при добавлении крахмала. По затраченным на титрование пробы и контроля объемам тиосульфата натрия, используя таблицу 5, определяют массу глюкозы и вычисляют разность между массой глюкозы в контроле и пробе. Массовую концентрацию глюкозы (мг/мл) рассчитывают по формуле: , где А и В – массы глюкозы, определенные по таблице, в пробе и контроле; V – объем вытяжки, взятый для анализа.

---

Ваша оценка:

Похожие:

	Рабочая программа дисциплины «биохимия» для специальностей: 260203 «Технология сахаристых продуктов»;		Биотехнология», 270500 «Технология бродильных производств и виноделие» Бийск 2006
	Биотехнология» и260204 «Технология бродильных производств и виноделие» Бийск Издательство Алтайского		Учебно-методический комплекс для студентов дневной и заочной формы обучения по специальности 260504
	Рабочая программа по дисциплине ен. Ф. 8 «Биохимия» для специальностей: 270300 «Технология хлеба,		Учебное пособие для студентов специальностей 271200 «Технология продуктов общественного питания»
	Конспект лекций по курсу технология лекаственных форм и галеновых препаратов для студентов специальности		Методические рекомендации к лабораторным работам по курсам «Основы микробиологии», «Микробиология»,
	В технологию продуктов питания” и спецкурсам для студентов всех форм обучения специальностей 070100,		Учебное пособие по курсу "Биотехнология" для студентов фармацевтического факультета нижний новгород

Разместите кнопку на своём сайте:
Медицина

---