Механизмы нарушения цитокинопосредованной регуляции апоптоза эозинофилов при больших эозинофилиях крови
|
|
Скачать 1.52 Mb.
|
|
^
Реализацию апоптотической гибели эозинофильных лейкоцитов оценивали методом проточной цитометрии с помощью аннексинового теста в условиях их инкубации in vitro в бессывороточной среде и с добавлением рекомбинантных форм цитокинов IL-3, IL-5 и eotaxin (r-IL-3, r-IL-5, r-eotaxin). ^ IL-5 – цитокин, регулирующий образование и созревание эозинофильных лейкоцитов в костном мозге. Наряду с этим этот цитокин является одним из ключевых медиаторов, способствующих активации и миграции эозинофилов в ткань. Известно также, что IL-5 увеличивает время жизни этих клеток, блокируя реализацию их апоптотической гибели. Основными клетками-продуцентами данного цитокина являются Th2-лимфоциты, а также сами эозинофилы. В связи с этим для нас представляло интерес исследование продукции IL-5 мононуклеарами крови и его влияния на регуляцию апоптоза эозинофильных лейкоцитов. Как показали результаты исследования, направленного на выявление способности мононуклеаров крови продуцировать эозинофилспецифичный цитокин, уровень базальной продукции IL-5 у здоровых лиц составил 96,5(89,0-105,0) пг/мл, а ФГА-стимулированной 164,0(158,0-190,0) пг/мл. Индекс стимуляции оказался равным 2,03(1,88-2,36) усл. ед. (табл. 8). Изучение цитокинпродуцирующей способности мононуклеарных лейкоцитов крови у лиц с гемобластозами без эозинофилии показало, что конституциональная и ФГА-инициированная продукции IL-5 составили 113,2(78,2-145,9) пг/мл (р=0,053) и 145,1(110,0-167,2) пг/мл (р=0,070), соответственно, не имея достоверной разницы с аналогичными показателями у здоровых доноров (табл. 8). В свою очередь, у больных лимфопролиферативными заболеваниями, ассоциированными с эозинофильной реакцией крови, отмечалось достоверное увеличение (по сравнению с нормой) продукции мононуклеарами IL-5. Так, при лимфоме Ходжкина уровень базальной продукции IL-5 превышал аналогичный показатель в контроле в среднем в 2,8 раза (р=0,041), а ФГА-индуцибельной - в 3,15 раза (р=0,041); при множественной миеломе - в 4,08 и 1,71 раза, соответственно (р=0,035 и р=0,045); при неходжкинских лимфомах - в 2,03 и 1,78 раза, соответственно (р=0,001 и р=0,014) по сравнению со здоровыми донорами (табл.8). Таблица 8 Содержание IL-5 в супернатантах культур мононуклеарных лейкоцитов крови у пациентов с гемобластозами, ассоциированными с эозинофилией (Me (Q1-Q3))
Исследование содержания IL-5 в супернатантах культур мононуклеарных лейкоцитов крови у пациентов с хроническим описторхозом, не сопровождавшимся эозинофилией, как в интактной, так и в ФГА-стимулированной пробах показало отсутствие статистически значимых различий по сравнению с аналогичными показателями в группе здоровых доноров (р=0,141 и р=0,058, соответственно) (табл. 9). Таблица 9 Содержание IL-5 в супернатантах культур мононуклеарных лейкоцитов крови у пациентов с описторхозом, ассоциированным с эозинофилией (Me (Q1-Q3))
При гельминтозе, вызванном O.felineus, ассоциированном с эозинофилией крови, регистрировалось статистически значимое повышение цитокинпродуцирующей способности мононуклеаров крови по сравнению с таковой у больных без эозинофилии и здоровых индивидуумов. Так, при остром описторхозе показатель базальной продукции IL-5 превышал (в среднем на 87%) норму, а ФГА-инициированной на 94% (р=0,001 и р=0,029, соответственно) (табл. 9). Наряду с этим конституциональная продукция вышеуказанного цитокина у пациентов с хроническим описторхозом, ассоциированным с эозинофилией, превосходила в среднем на 60% таковую у больных группы сравнения (без эозинофилии) и на 71% - у здоровых доноров (р=0,002 и р=0,027, соответственно), а ФГА-индуцибельная - в среднем на 46 и 38% (р=0,014 и р=0,028) соответственно (табл. 9). Исследование реализации апоптотической программы эозинофилов, полученных у здоровых доноров, в условиях инкубации in vitro с r-IL-5 позволило зарегистрировать статистически значимое снижение относительного и абсолютного числа эозинофильных клеток в апоптозе по сравнению с его интактным уровнем - в 2,1 и 2,7 раза (p<0,01 и p<0,05, соответственно) (табл. 10). Таблица 10 Содержание апоптотических эозинофилов крови у пациентов с гемобластозами, ассоциированными с эозинофилией, в условиях культивирования in vitro с рекомбинантной формой цитокина IL-5 (r-IL-5) (  ±m)
При инкубации in vitro эозинофильных лейкоцитов, полученных у больных гемобластозами, сопровождавшимися эозинофилией крови, с r-IL-5 фиксировалось снижение относительного и абсолютного содержания апоптотических клеток по сравнению с аналогичными показателями контроля: до 3,25±0,35% и (0,110±0,002)·109/л - при лимфогранулематозе (р=0,019 и р=0,001, соответственно), до 3,14±0,38% и (0,035±0,001)·109/л - при множественной миеломе (р=0,015 и р=0,038, соответственно) и до 3,38±0,08% и (0,070±0,001)·109/л - при неходжкинских лимфомах (р=0,021 и р=0,004, соответственно) (табл. 10). Следует отметить, что значения изученных показателей не отличались от таковых в интактных культурах (p>0,05) (табл. 10). В то же время у лиц с болезнью Ходжкина выявлялось снижение абсолютного числа эозинофилов в апоптозе на 38% по сравнению с аналогичными параметрами спонтанного апоптоза (p<0,01) (табл. 10). При инкубации эозинофильных лейкоцитов, полученных у больных описторхозом, в среде с r-IL-5 регистрировалось достоверное снижение (по сравнению со здоровыми донорами) относительного числа клеток в апоптозе (в 2 раза при остром и в 1,8 раза при хроническом описторхозе (р=0,013 и р=0,022, соответственно)). Наряду с этим отмечалось статистически значимое уменьшение относительного и абсолютного числа апоптотически измененных эозинофилов по сравнению с уровнем спонтанного апоптоза в 2,0 и 1,4 раза у больных острым описторхозом (р<0,05 и р<0,05, соответственно) и в 2,5 и 2,3 раза при хроническом описторхозе (р<0,01 и р<0,01, соответственно) (табл. 11). Таким образом, у всех обследованных лиц с выраженной эозинофилией крови выявлялась повышенная продукция IL-5 мононуклеарными клетками. Инкубация эозинофильных лейкоцитов, полученных у пациентов с лимфопролиферативными заболеваниями системы крови, с r-IL-5 позволила выявить отсутствие чувствительности клеток к антиапоптотическому влиянию данного медиатора; напротив, у больных описторхозом в эксперименте отмечена повышенная чувствительность эозинофилов к апоптозингибирующему действию IL-5. Таблица 11 Содержание апоптотических эозинофилов крови у пациентов с описторхозом, ассоциированным с эозинофилией, в условиях культивирования in vitro с рекомбинантной формой цитокина IL-5(r-IL-5) ( ±m) |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
отлично
1
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям