Методические указания к лабораторным работам и вопросы для самостоятельной подготовки студентов 2-го курса эколого-биологического факультета

Скачать 1.18 Mb.

Название	Методические указания к лабораторным работам и вопросы для самостоятельной подготовки студентов 2-го курса эколого-биологического факультета
страница	6/7
Дата	05.04.2013
Размер	1.18 Mb.
Тип	Методические указания

Содержание

Раздел 7. гормоны
Ход работы.
Ход работы.
Ход работы.
Ход работы.
Ход работы.
Ход работы.
Ход работы.
Ход работы.
Ход работы.
Ход работы

1 2 3 4 5 6 7

№ проб	Содержание фосфора, мкг/мл	Е_сред.
1	5
2	10
3	15
4	20
5	25
Кровь

Калибровочная кривая

Расчет по формуле:

Общие выводы по работе:

^ РАЗДЕЛ 7. ГОРМОНЫ

РАБОТА 23. КАЧЕСТВЕННЫЕ РЕАКЦИИ НА ГОРМОНЫ

Цель работы: ознакомиться с некоторыми химическими свойствами готовых препаратов гормонов.

Задачи:

проделать перечисленные ниже химические реакции;
проанализировать полученные результаты и сделать вывод.

Гормоны – биологически активные органические соединения, участвующие в регуляции обмена веществ.

1. Качественные реакции на инсулин

Инсулин – низкомолекулярный простой белок, синтезируемый -клетками островковой ткани поджелудочной железы. Качественные реакции, характерные для белков, подтверждают белковую природу инсулина.

а) Биуретовая реакция

^ Ход работы. К 10 каплям раствора инсулина прибавляют 5 капель 10%-го раствора гидроксида натрия и 1 каплю 1%-го раствора сульфата меди. Жидкость окрашивается в фиолетовый цвет.

б) Реакция Фоля

^ Ход работы. 5 капель раствора инсулина смешивают с 5 каплями реактива Фоля и смесь кипятят 1-2 мин до появления бурого осадка.

в) Реакция Милона

Ход работы. В пробирке смешивают 10 капель раствора инсулина и 2-3 капли реактива Милона. Смесь осторожно нагревают до образования осадка в виде сгустка красного цвета.

г) Реакция Геллера

^ Ход работы. Пробирку с 10 каплями концентрированной азотной кислоты наклоняют под углом 45^о и осторожно по стенке приливают 10 капель раствора инсулина. На границе двух жидкостей образуется белое кольцо.

д) Реакция с раствором гидроксида натрия

^ Ход работы. В пробирку приливают 10 капель раствора инсулина, а затем по каплям 0,1%-й раствор гидроксида натрия до выпвдения хлопьевидного осадка. Осадок растворяется при подкислении 0,5%-м раствором уксусной кислоты до рН=2,5-3,5 (по универсальной индикаторной бумаге).

е) Реакция с сульфосалициловой кислотой

^ Ход работы. К 10 каплям раствора инсулина прибавляют 3-5 капель 20%-го раствора сульфосалициловой кислоты до выпадения белого осадка.

2. Качественные реакции на адреналин

Адреналин – гормон, который синтезируется в мозговом веществе надпочечников. По химической природе адреналин является производным пирокатехина и легко окисляется, превращаясь сначала в дегидроадреналин, а затем в неактивный хинон красного цвета – адренохром:

Адренохром может участвовать в дальнейших окислительно-восстановительных реакциях или полимеризуется с образованием высокомолекулярного пигмента – меланина коричневого цвета.

Качественные реакции на адреналин обусловлены его окислением до адренохрома или реакционной способностью пирокатехинового кольца.

а) Реакция с хлорным железом

При добавлении к раствору адреналина хлорида железа (III) жидкость окрашивается в изумрудно-зеленый цвет, характерный для комплексного соединения типа фенолята, образующегося за счет гидроксильных групп пирокатехинового кольца. В щелочной среде окраска меняется на красную, а затем коричневую вследствие появления адренохрома и продуктов его полимеризации.

^ Ход работы. 3-5 капель 0,1%-го раствора адреналина смешивают в пробирке с 1 каплей 1%-го раствора хлорного железа. Появляется зеленое окрашивание. Затем добавляют 1 каплю 10%-го раствора гидроксида натрия, при этом окраска переходит в вишнево-красную, а затем в коричневую.

Эту же реакцию делают с 0,05%-м раствором пирокатехина

б) Диазореакция

При взаимодействии диазореактива с адреналином образуется азокраситель красного цвета. Диазореактив – смесь сульфаниловой кислоты и азотистой кислоты (или ее соли):

^ Ход работы. В пробирку вносят 3 капли 1%-го раствора сульфаниловой кислоты, 3 капли 5%-го раствора азотистокислого натрия, 5 капель 0,1%-го раствора адреналина и 3 капли 10%-го раствора углекислого натрия. Жидкость окрашивается в красный цвет.

в) Реакция с нитритно-молибденовым реактивом

Ход работы. В пробирку наливают 5 капель 0,1%-го раствора адреналина, 5 капель 5%-го раствора соляной кислоты и 5 капель нитритно-молибденового реактива. Смесь перемешивают. Появляется желто-оранжевое окрашивание, которое при добавлении 3-5 капель 10%-го раствора гидроксида натрия меняется на малиново-красное а после внесения 3-5 капель концентрированной соляной кислоты становится лимонно-желтым.

г) Реакция с реактивом Фолина

Входящие в состав реактива Фолина соли фосфорновольфра-мовой и фосфорномолибденовой кислот при взаимодействии с фено-лами восстанавливаются с образованием оксидов, окрашенных в синий цвет.

^ Ход работы. В пробирке смешивают 2 капли 0,1%-го раствора адреналина и 5 капель 10%-го раствора карбоната натрия. Через 3-4 минуты добавляют 1 каплю реактива Фолина. Появляется синее окрашивание.

д) Реакция с йодатом калия

Адреналин образует в кислой среде с йодноватистокислым калием соединение красно-фиолетового цвета.

^ Ход работы. В пробирку вносят 5 капель 0,1%-го раствора адреналина, 2 капли 10%-го раствора КIО₃ и 5 капель 10%-го раствора уксусной кислоты. Содержимое пробирки нагревают до температуры 60-65 ^оС и наблюдают появление красно-фиолетового окрашивания.

3. Качественная реакция на тироксин

Тироксин – йодсодержащий гормон щитовидной железы:

Тироксин содержится в тиреоидине – препарате, получаемом из обезжиренной и высушенной щитовидной железы крупного рогатого скота. Тироксин, освободившийся при разрушении тиреоидина, подвергают щелочному гидролизу, в результате которого образуется йодид калия. Йод из йодистого калия вытесняют йодноватистокислым калием и обнаруживают с помощью качественной реакции с крахма-лом (синее окрашивание в кислой среде):

5KI + KIO₃ + 6HCl  3I₂ + 6KCl + 3H₂O,

I₂ + крахмал  синее окрашивание.

^ Ход работы

а) Гидролиз тиреоидина

5 таблеток тиреоидина тщательно растирают в фарфоровой ступке. Порошок переносят в коническую колбу, добавляют 5 мл 10%-го раствора бикарбоната калия и 5 мл дистиллированной воды. Колбу закрывают пробкой с обратным холодильником и смесь кипятят 15 мин (с момента закипания) при умеренном нагревании.

б) Обнаружение йода в гидролизате

В пробирку вносят 24 капли охлажденного гидролизата и добавляют по каплям 10%-й раствор серной кислоты до кислой реакции (на лакмус). После подкисления прибавляют 3 капли 1%-го раствора крахмала и 5-10 капель 2%-го раствора йодноватисто-кислого калия (не следует добавлять избыток) до появления синего окрашивания.

1 2 3 4 5 6 7

плохо

не очень плохо

средне

хорошо

отлично

Ваша оценка этого документа будет первой.

Ваша оценка:

	Методические указания к лабораторным работам и контрольные вопросы и задачи для студентов II курса		Методические указания к лабораторным работам по биологической химии для студентов 2 курса медицинского
	Методические указания по медицинскому и фармацевтическому товароведению для студентов 4 курса заочной		Методические указания для самостоятельной подготовки студентов 5 курса к практическим занятиям по
	Методические указания по внеаудиторной самостоятельной работе для студентов 5 курса лечебного факультета		Методические указания к лабораторным занятиям по нормальной физиологии для студентов II курса Тирасполь,
	Календарный план практических занятий по анатомии человека для студентов 1 курса эколого-биологического		Календарный план практических занятий по анатомии человека для студентов 1 курса эколого-биологического
	Методические указания для подготовки к экзамену по патологической анатомии для студентов II курса		Методические указания для самостоятельной подготовки студентов учебное пособие