«Микробиологическая диагностика стафилококковых и стрептококковых инфекций»
|
|
Скачать 2.73 Mb.
|
|
^
Начиная с 4-й недели от момента появления твердого шанкра, наступает серо-позитивный период, когда с целью диагностики сифилиса можно ставить различные серологические реакции. Особенность серологического метода заключается в том, что могут быть использованы неспецифический и специфический антигены (соответственно неспецифические и специфические реакции).
а) ТРЕПОНЕМЫ РЕЙТЕРА - культуральные спирохеты, выращенные на искусственной питательной среде и не обладающие вирулентностью; б) ТРЕПОНЕМЫ НИКОЛЬСА ИЛИ ТКАНЕВЫЕ ТРЕПОНЕМЫ - патогенные трепонемы, полученные при заражении кролика в яички бледной трепонемой. Из трепонемальных тестов в настоящее время чаще всего используют иммунофлюоресцентный адсорбционный тест (ИФАТ) и трепонемальную микрогемагглютинацию. В обоих случая сыворотку больного предварительно адсорбируют трепонемами Рейтера для удаления антител к общим для всех видов спирохет антигенам. В качестве антигена в ИФАТ используют трепонемы Никольса, а в микрогемагглютинации -эритроциты с сорбированными на них антигенами трепонемы Никольса. К трепонемальным тестам относятся также РСК (в качестве антигена используют взвесь убитых трепонем - трепонемы-Никольса) и реакция иммобилизации трепонем. ^ Для постановки реакции связывания комплемента по Вассерману при подозрении на сифилис необходимы следующие компоненты:
Реакцию Вассермана ставят по общепринятой методике РСК. Отсутствие же гемолиза в опытной пробирке свидетельствует о положительной реакции Вассермана. Наличие гемолиза в опытной пробирке соответственно трактуется как отрицательная реакция Вассермана (человек здоров). ^
Инкубация при температуре 137°С - 40 минут.
Результат реакции оценивают по степени задержки гемолиза: ++++ - резкоположительная реакция (полное отсутствие гемолиза) +++ - положительная реакция ++и+ - слабоположительная реакция - отрицательная реакция ^ Специфическая профилактика не разработана. Неспецифическая профилактика предусматривает воздержание от случайных половых связей, раннее выявление больных, особенно со скрытой формой заболевания, и их своевременное и эффективное лечение. Для лечения сифилиса используют антибиотики: пенициллин и его производные (водорастворимые и дюрантные формы), иногда эритромицин. Используют также препараты висмута, мышьяка, ртути. ^ Сифилис — хроническое инфекционное заболевание, вызываемое бледной трепонемой. Сифилис характеризуется весьма своеобразным течением: во-первых, волнообразной сменой активных проявлений и периодов скрыто протекающей инфекции; во-вторых, постепенным и последовательным изменением клинической и патологоанатомической картины поражений органов и тканей от слабовыраженных воспалительных явлений до образования специфических глубоких инфекционных гранулем, сдавливающих и разрушающих органы и ткани, в которых они локализуются, что приводит к потере функции органа, а иногда и к смерти больного. Различают приобретенный и врожденный сифилис. Врожденный сифилис возникает при попадании бледной трепонемы в организм плода через плаценту от больной сифилисом матери. Для заражения человека сифилисом необходимо проникновение бледной трепонемы через кожу или слизистую оболочку, целостность которой нарушена. Обычно заражение происходит половым путем. Внеполовое заражение может быть профессиональным, например, у медицинских работников во время операций, вскрытий, стоматологического или гинекологического осмотра и т.д., или произойти при пользовании общей посудой, губной помадой, мундштуками и др. В связи с волнообразным течением сифилиса, разным характером клинических и морфологических изменений, возникающих на различных этапах заболевания, различают инкубационный, первичный, вторичный и третичный периоды приобретенного сифилиса, а также скрытый, в том числе неведомый, висцеральный сифилис и сифилис нервной системы. Инкубационный период сифилиса в среднем равен 3—4 нед., однако возможно как его укорочение (до 10—12 дней), так и удлинение (до 6 мес), которое обычно связано с приемом во время инкубации небольшого количества антибиотиков по поводу интеркуррентных заболеваний или гонореи. ^ начинается с возникновения на месте заражения, т.е. внедрения бледной трепонемы, твердого шанкра (первичная сифилома). Первичный период длится 6—7 нед. Спустя 5—7 дней после образования твердого шанкра появляется второй непременный симптом первичного периода — увеличиваются регионарные лимфатические узлы (бубон, или регионарный склераденит). В этих узлах происходит бурное размножение трепонемы. Из лимфатических узлов по лимфатическим путям уже в начале первичного периода трепонемы попадают в кровь, в ответ на это постепенно начинают вырабатываться антитела, которые в конце 3-й недели первичного периода сифилиса можно определить в крови с помощью классических серологических реакций (реакция Вассермана, осадочные реакции), несколько раньше — с помощью реакции иммунофлюоресценции (РИФ), а несколько позднее - и с помощью реакции иммобилизации бледных трепонем (РИБТ, или РИТ). Примерно у 20% больных к концу первичного периода сифилиса развиваются общие симптомы (повышение температуры тела до 38—38,5°С, слабость, головная боль, боли в костях, особенно по ночам), в периферической крови наблюдаются небольшая анемия, лейкоцитоз, увеличение СОЭ. Спустя 4—6 дней на этом фоне на коже туловища, а нередко и на слизистой оболочке полости рта появляется сыпь, что свидетельствует об окончании первичного и начале вторичного периода сифилиса. Слизистая оболочка полости рта и красная кайма губ являются локализацией сифилитических высыпаний во всех стадиях заболевания, в том числе и при первичном сифилисе. При внеполовых заражениях локализация шанкра на губах и слизистой оболочке полости рта встречается наиболее часто. Твердый шанкр может возникнуть на любом участке красной каймы губ или слизистой оболочки полости рта, но чаще всего он локализуется на губах, языке, миндалинах. Развитие твердого шанкра на губе или слизистой оболочке полости рта, как и на других местах, начинается с появления ограниченной красноты, в основании которой в течение 2—3 дней возникает уплотнение за счет воспалительного инфильтрата. Это ограниченное уплотнение постепенно увеличивается и достигает обычно 1—2 см в диаметре. В центральной части поражения происходит некроз и образуется эрозия мясо-красного цвета, реже — язва. Достигнув полного развития в течение 1 —2 нед, твердый шанкр на слизистой оболочке обычно представляет собой круглую либо овальную, безболезненную эрозию мясо-красного цвета или язву с блюдцеобразными краями размером от 3 мм (карликовые шанкры) до 1,5 см в диаметре с плотноэластическим инфильтратом в основании. В соскобе поверхности шанкра легко обнаруживаются бледные трепонемы. Иногда эрозии покрыты серовато-белым налетом. При расположении шанкра на губах иногда образуется значительный отек, вследствие которого губа отвисает, а шанкр держится дольше, чем на других местах. Чаще развивается один твердый шанкр, реже - два и более. Если присоединяется вторичная инфекция, то эрозия может углубляться, при этом образуется язва с грязно-серым некротическим налетом. На языке твердый шанкр обычно бывает одиночным, возникает чаще в средней трети. Помимо эрозивной и язвенной форм, у лиц со складчатым языком, при локализации твердого шанкра вдоль складок может возникнуть щелевидная форма. При расположении твердого шанкра на спинке языка из-за значительного инфильтрата в основании шанкр обычно резко выступает над окружающей тканью, на его поверхности имеется мясо-красная эрозия. Обращают на себя внимание отсутствие воспалительных явлений вокруг шанкра и его безболезненность. Твердый шанкр в области десен имеет вид ярко-красной гладкой эрозии, которая в виде полулуния окружает один-два зуба. Язвенная форма твердого шанкра десны очень сходна с банальным изъязвлением и почти не имеет каких-либо признаков, характерных для первичной сифиломы. Диагностику облегчает наличие бубона в подчелюстной области. При локализации на миндалине твердый шанкр может иметь одну из трех форм: язвенную, ангиноподобную (амигдалит) и комбинированную — язвенную на фоне ангиноподобной. Поражается миндалина на одной стороне. При язвенной форме миндалина увеличена, плотная, на этом фоне наблюдается мясо-красная овальная язва с пологами ровными краями. Слизистая оболочка вокруг язвы гиперемирована. Процесс сопровождается болевыми ощущениями, иногда значительными. При ангиноподобном шанкре эрозия или язва отсутствует, имеется одностороннее значительное увеличение миндалины. Она приобретает медно-красный цвет, безболезненная, плотная. Процесс отличается от ангины односторонностью поражения, отсутствием болей и острой воспалительной гиперемии. Общих явлений нет, температура тела нормальная. Шанкр на губах следует дифференцировать от простого пузырькового лишая, при котором в отличие от сифилиса высыпаниям предшествует жжение или зуд, эрозия располагается на гиперемированном, слегка отечном основании и имеет микрополициклические очертания. Кроме того, при пузырьковом лишае эрозивным высыпаниям предшествуют пузырьки, которые никогда не возникают в процессе формирования шанкра. В отличие от твердого шанкра герпетические эрозии почти всегда характеризуются быстрым возникновением и быстрой эпителизацией, кроме того, герпес в отличие от твердого шанкра часто имеет рецидивирующее течение. Следует учесть, что при длительном существовании герпетической эрозии на губе в ее основании появляется инфильтративное уплотнение, что усиливает сходство эрозии с первичной сифиломой. ^ начинается через 6—7 нед. после появления твердого шанкра, когда на фоне симптомов, свойственных первичному периоду сифилиса (твердый шанкр, регионарный склераденит, полиаденит), появляется обильная розеолезно-папулезная сыпь. Вторичный период сифилиса продолжается в течение 3—5 лет и сопровождается положительными серологическими реакциями. Особенностью вторичного периода сифилиса является волнообразное течение, когда периоды активного проявления болезни сменяются периодами скрытого, бессимптомного течения болезни, причем продолжительность каждого из этих периодов индивидуальна (в среднем по 1,5—2 мес). Активная стадия заболевания, развивающаяся в начале вторичного периода сифилиса вследствие генерализации инфекции, характеризуется большим количеством розеолезно-папулезных, а иногда и пустулезных высыпаний, полиаденитом, склераденитом, остатками твердого шанкра и носит название вторичный свежий сифилис. К концу периода вторичного свежего сифилиса разрешается твердый шанкр, исчезают розеолезно-папулезные высыпания, ликвидируется регионарный склераденит и полиаденит. Слизистая оболочка полости рта является частым местом локализации сифилидов вторичного периода, причем при вторичном рецидивном сифилисе высыпания во рту могут быть единственным клиническим проявлением болезни. Почти у половины больных с явлениями вторичного сифилиса наблюдаются поражения слизистой оболочки рта в виде розеолезных и папулезных элементов, пустулезные высыпания на слизистой оболочке рта возникают крайне редко. Розеолезные высыпания на слизистой оболочке рта возникают симметрично на дужках, мягком небе, язычке и миндалинах. Особенностью розеолезных высыпаний в этой области является то, что они сливаются в сплошные очаги поражения (эритематозная ангина). Пораженная область имеет застойно-красный цвет, иногда с медным оттенком, резкие границы. Слизистая оболочка в этой области слегка отечна; больные ощущают неловкость при глотании, болезненность, но субъективные ощущения могут и отсутствовать. Разрешение эритематозной ангины начинается с центральной части. Наиболее частым проявлением вторичного сифилиса на слизистой оболочке рта являются папулезные высыпания. Они могут возникать в любом месте слизистой оболочки, но чаше на миндалинах, дужках, мягком небе, где нередко папулы сливаются в сплошные очаги поражения (папулезная ангина), языке, слизистой оболочке щек, особенно по линии смыкания зубов, деснах и т.д. Вид папул зависит от длительности их существования. Вначале папула - резко ограниченный темно-красный очаг размером до 1 см в диаметре с небольшим инфильтратом в основании. Спустя некоторое время образующийся в результате происходящего воспаления экссудат пропитывает покрывающий папулу эпителий, и она приобретает весьма характерный вид. ^ наблюдается далеко не у всех больных, даже если они не лечатся. Он начинается через 4—6 лет после начала заболевания в связи с изменением реактивности организма, чувствительности его к бледной трепонеме и т.д. и имеет злокачественное течение. Третичный период может продолжаться десятилетиями, характеризуется развитием воспалительных инфильтратов (гумм и бугорков), склонных к распаду и нередко вызывающих значительные деструктивные, порой несовместимые с жизнью изменения в органах и тканях. В то же время высыпания третичного сифилиса не заразны для окружающих, так как в их отделяемом отсутствуют бледные трепонемы. В третичный период сифилиса на слизистой оболочке рта могут появиться гуммы, гуммозная диффузная инфильтрация и бугорковые высыпания. При этом слизистая оболочка может быть единственным местом клинического проявления заболевания. Гуммозный сифилид может локализоваться в любом месте слизистой оболочки рта. Чаще гуммы образуются на мягком и твердом небе и языке. Обычно гумма появляется в единственном числе. Вначале образуется безболезненный узел, который постепенно увеличивается, а затем вскрывается. Отторгается гуммозный стержень, после чего образуется гуммозная язва. Этот процесс длится 3—4 мес, иногда сопровождаясь незначительными субъективными ощущениями. Невскрывшаяся гумма имеет плотную консистенцию, гладкую поверхность, слизистая оболочка над узлом умеренно воспалена, она имеет застойно-красную резко ограниченную окраску. После отделения стержня гуммозная язва имеет кратерообразную форму, плотные края, безболезненна, дно ее покрыто грануляциями. Язва постепенно заживает с образованием звездчатого втянутого рубца. При локализации на небе на месте гуммы нередко образуется перфорация, сохраняющаяся после разрешения процесса. На твердом небе гумма обычно располагается по средней линии. Вследствие того, что слизистая оболочка тонка и интимно связана с надкостницей неба начинающийся гуммозный процесс очень быстро переходит на периост и кость. Инфильтрат гуммы быстро распадается, и обнажается кость, которая некротизируется и секвестрируется, возникает сообщение между полостями рта и носа. Лечение больного сифилисом может быть начато только после подтверждения клинического диагноза обнаружением бледных трепонем при первичном и вторичном сифилисе или положительными серологическими реакциями. Под влиянием противосифилитического лечения высыпания быстро исчезают, причем уже через 8—10 ч после начала пенициллинотерапии бледные трепонемы не обнаруживаются на поверхности высыпаний. В связи с этим больные сифилисом через 10—12 ч после начала лечения пенициллином практически не заразны при бытовом контакте, а также при осмотре их врачами, в том числе стоматологами. Стоматолог в своей практике может столкнуться с больным третичным сифилисом, у которого единственным проявлением заболевания могут оказаться гуммозные или бугорковые высыпания на слизистой оболочке рта. Лечение таких больных нельзя начинать с введения пенициллина, так как он вызовет реакцию обострения, которая будет стимулировать быстрое рассасывание сифилитических высыпаний, что может привести к катастрофе, даже к смерти больного, если такие высыпания локализуются в жизненно важных органах. Это связано с тем, что при таком лечении рассасывание инфильтрата произойдет за 2—3 дня, в течение которых не успеет образоваться замещающая их соединительная ткань. В связи с этим лечение больных третичным сифилисом всегда следует начинать с приема йода в течение 2—4 нед, затем вводят половину курсовой дозы препарата висмута и лишь потом пенициллин, после чего вторую половину курсовой дозы препарата висмута; второй и последующие курсы лечения начинают, как обычно, т.е. с пенициллина. Стоматолог может встретиться с больным, который перенес третичный или поздний врожденный сифилис и у которого имеется перфорация неба, требующая пластической операции. Следует иметь в виду, что больные сифилисом после окончания лечения 5 лет находятся на диспансерном учете, в течение этого времени у них определяют излеченность сифилиса. В связи с этим пластическую операцию таким больным следует делать после снятия их с учета. Если же возникает необходимость в операции до этого срока, то оперативное вмешательство необходимо проводить под защитой пенициллина, в этом случае величину суммарной дозы препарата определяют коллегиально с венерологом, под наблюдением которого находится больной. При лечении проявлений сифилиса в полости рта могут возникнуть осложнения, связанные с применением пенициллина и препаратов висмута. Пенициллин и его препараты могут вызвать острый аллергический медикаментозный стоматит, в связи с которым необходимо прекратить введение пенициллина, и кандидоз. Последнее осложнение у больных сифилисом не требует обязательной отмены пенициллина. Осложнениями от препаратов висмута являются висмутовая кайма, висмутовый гингивит и стоматит. В зависимости от локализации воспалительного процесса поражение слизистой оболочки полости рта называется различно: стоматит (слизистая щек), глоссит (язык), гингивит (десны), хейлит (губы). Стоматиты обычно являются либо следствием различных дистрофических процессов в организме, инфекционных или соматических заболеваний, либо результатом повреждающего физического или химического воздействия на слизистую при вторичной роли резидентной микрофлоры. При поверхностных катаральных стоматитах обычно обнаруживают Гр + аэробные кокки и палочки, при глубоких стоматитах преобладает строго анаэробная Гр - флора (фузобактерии, бактероиды, пептострептококки). При язвенно-некротических стоматитах преобладает анаэробная флора, преимущественно фузобактерии и спирохеты, однако могут присутствовать и другие микроорганизмы (вейллонелы, пептострептококки, бактероиды, вибрионы, актиномицеты). К фузоспирохетозам также относят язвенно - некротическую ангину Венсана, ангину Людвига, гангрену легкого, язвенный колит и др.). В последние годы отмечается рост заболеваемости кандидомикозом. Это связано с широким применением антибиотиков, кортикостероидов, цитостатиков. Длительное их применение приводит к нарушению состава нормальной микробной флоры (дисбактериоз). Грибы кандида являются резидентом слизистых оболочек полости рта, пищеварительного тракта, дыхательных путей, влагалища, кожных покровов. Процесс взаимоотношения дрожжевых клеток с эпителиальными клетками слизистой оболочки рта начинается с их адгезии. Сахароза, мальтоза, глюкоза и другие углеводы повышают активность адгезии. Адгезивность дрожжеподобных грибов рода Candida во многом определяет их вирулентность. Система комплемента, которая активизируется маннаном клеточной стенки дрожжей, ингибирует их адгезию. Дрожжеподобные грибы способствуют разрушению зубной эмали и развитию кариеса. Кариозные зубы, в которых вегетируют дрожжевые клетки, можно рассматривать, как своеобразную экологическую нишу-, благодаря которой они могут участвовать в развитии микотических тонзиллитов и стоматитов. Местные проявления кандидоза или первичный кандидоз в полости рта протекает в форме острого псевдомембранозного кандидоза (молочницы), острого или хронического кандидоза и гиперпластического кандидоза. Тестовые задания: Таксономическое положение возбудителя сифилиса:
Серологические реакции, применяемые при диагностике сифилиса:
Основной метод диагностики возвратных тифов:
Методы окраски спирохет:
Материал для диагностики лептоспирозов:
Этиология возвратного тифа:
^ Задача 1. Мужчина 40 лет обратился к врачу на 8-ой день болезни. Несколько дней назад он купался в реке, выше по течению которой было место водопоя скота. Среди животных в данной местности регистрировались заболевания лептоспирозом. Врач заподозрил возможность лептоспироза. Какой материал на данном этапе болезни необходимо взять у больного и с помощью какого микробиологического метода можно поставить диагноз? Задача 2. У больного, обратившегося в кожно-венерологический диспансер, обнаружен твердых шанкр. Какое микробиологическое исследование позволит поставить диагноз сифилиса на данном этапе болезни? Занятие № 11. Тема занятия: «Микробиологическая диагностика микоплазмозов и хламидиозов». План занятия:
Хламидии и хламидиозы Хламидии — уникальная группа мелких патогенных грамотрицательных неподвижных бактерий, являющихся возбудителями различных болезней человека и животных. В 1907г. С. Провачек обнаружил возбудителя трахомы и назвал его «Chlamydozoa» в связи с тем, что образуемые им внутриклеточные микроколонии (тельца Гальберштедтера-Провачека) представляются окутанными мантией («хламидой»). Хламидии относятся к порядку Chlamydiales, семейству Chlamydiaceae, роду Chlamydia. Их главная биологическая особенность заключается в том, что они размножаются только в цитоплазме эукариотных клеток по уникальному среди организмов циклу развития. В отличие от вирусов, хламидии содержат как ДНК (ядерный аппарат), так и рибосомы. Они имеют клеточную стенку, химический состав которой сходен с составом таковой у грамотрицательных бактерий, и размножаются путем поперечного деления. Вместе с тем, подобно вирусам и риккетсиям, хламидии — облигатные внутриклеточные паразиты, так как их метаболизм зависит от метаболизма клетки-хозяина. Эта зависимость проявляется в неспособности хламидий синтезировать свои собственные высокоэнергетические соединения, такие, как АТФ, и отсутствии цитохромов, т. е. они являются «энергетическими паразитами» и потому не способны размножаться вне живой клетки. Основные стадии жизненного цикла хламидии следующие:
Элементарные тельца являются инфекционной, а ретикулярные – вегетативной формой хламидий. Вегетативные формы размножаются путем деления внутриклеточно, но не инфекционны, когда выделяются из клетки-хозяина. Жизненный цикл хламидий начинается с того, что элементарные тельца фагоцитируются клеткой-хозяином, а затем в течение нескольких часов реорганизуются путем поперечного деления. Образующиеся дочерние формы также размножаются путем бинарного деления. Жизненный цикл заканчивается, когда возникающие промежуточные формы реорганизуются (уплотняются), уменьшаются в размерах и превращаются в элементарные тельца. Размножаясь внутри цитоплазматических везикул, хламидии образуют микроколонии, окруженные мембраной, возникающей из впячивания мембраны клетки при фагоцитозе элементарного тельца. В составе микроколоний обнаруживается все 3 стадии развития хламидий. В одной клетке может быть несколько микроколоний, образующихся в случае фагоцитоза нескольких элементарных телец. После разрыва стенки везикулы и мембраны клетки-хозяина вновь образовавшиеся хламидии высвобождаются, и элементарные тельца, инфицируя другие клетки, повторяют цикл развития. Для микроскопического обнаружения хламидий в инфицированных клетках (тканях) применяют различные способы окрашивания: Романовского-Гимзы, Кастенады, Маккиавелло и другие. При окрашивании по Романовскому-Гимзе они приобретают голубой или фиолетовый цвет. Однако хламидии хорошо видны и в неокрашенном состоянии при микроскопии влажных препаратов под стеклом с помощью фазовоконтрастной оптической системы. В оптимальных условиях роста в эукариотных клетках жизненный, цикл хламидий составляет 17-70 ч. Хламидии хорошо размножаются в желточном мешке куриных эмбрионов при температуре от 33 до 41 С (в зависимости от вида), а также в культурах клеток различных позвоночных. Хламидии имеют сложное антигенное строение. Они содержат общий для рода термостабильный антиген и термолабильные видоспецифические и типоспецифические антигены белковой природы. Хламидии — строгие внутриклеточные паразиты позвоночных, но они обнаружены и в (или на) эктопаразитирующих членистоногих. Многие штаммы вызывают генерализованные инфекции у различных хозяев, но некоторые штаммы вызывают резко выраженные воспаления в одной или нескольких тканях или органах только определенных видов позвоночных. Штаммы хламидии обнаружены у трех больших групп: у людей, птиц и млекопитающих (включая приматов). У людей они вызывают заболевания глаз, мочеполовой и дыхательной систем; у птиц — респираторные болезни и генерализованную инфекцию; у млекопитающих — заболевания дыхательных путей, суставов, плаценты и кишечные болезни. Некоторые штаммы хламидии патогенны и для человека, и для птиц. Chlamydia pneumoniae Респираторный хламидиоз – инфекционное заболевание, вызываемое хламидиями, проявляющееся в виде пневмонии (хламидийная пневмония), катара верхних дыхательных путей и общей интоксикации. Возбудитель — Chlamydia pneumoniae — имеет родовой антиген, общий с антигенами других видов, белковый видоспецифический и, возможно, типоспецифические антигены. Жизненный цикл аналогичен циклу других хламидий, но элементарные тельца имеют не сферическую, а грушевидную форму, образующуюся за счет расширенного периплазматического пространства. Кроме того, С.pneumoniae не синтезируют гликоген в своих микроколониях. Хламидий этого вида скудно размножаются в желточных мешках куриных эмбрионов и в культурах клеток. Обладают выраженным тропизмом к эпителию дыхательных путей. Болезнь широко распространена. Эпидемические вспышки отмечены во многих странах Западной Европы, Америки и в Австралии. Источником инфекции является больной человек. Возбудитель выделяется с отделяемым носоглотки. Механизм заражения — воздушно-капельный. Восприимчивость людей к возбудителю высокая, у детей и престарелых заболевание протекает в более тяжелой форме; у молодых людей — чаще в виде легких форм. Основная клиническая форма болезни — мелкоочаговая и (или) интерстициальная пневмония, выявляемая рентгенологически. Лечение. Наиболее эффективны антибиотики: тетрациклины, макролиды, угнетающие размножение возбудителя. Лабораторная диагностика хламидиозов Поскольку хламидиозы распространены глобально, а их клинические проявления очень разнообразны, особое значение в диагностике этих заболеваний имеют лабораторные методы. В зависимости от формы болезни материалом для исследования служат: соскобы с конъюнктивы, экссудат из бубонов, смывы из носоглотки, уретры, материал, взятый тампоном со слизистой оболочки дыхательных, мочеполовых путей, мокрота, кровь (во время лихорадки), а также секционный материал (кусочки печени, селезенки, легких и других тканей). ^ состоит из предварительного микроскопического исследования материала, выделения возбудителя и его идентификации. Предварительное исследование заключается в бактериоскопии с целью обнаружения хламидий в инфицированных клетках либо с помощью прямой или непрямой иммунофлуоресценции, либо с использованием фазово-контрастной оптики, либо с применением окраски по Романовскому-Гимзе. Для выделения возбудителя исследуемым материалом заражают культуры клеток (лучше всего L-929, McCoy, HeLa) или куриные эмбрионы. Для подавления роста бактерий исследуемый материал обрабатывают гентамицином, стрептомицином и канамицином. Зараженные культуры клеток инкубируют при 35-36 °С в течение 6 дней, а затем микроскопируют с помощью фазового контраста, иммунофлуоресценции, ставят пробу на гликоген и определяют принадлежность к роду Chlamydia с помощью РСК с групповым антигеном. РСК считается положительной в разведении 1:8. При заражении куриных эмбрионов исследуют желточные мешки эмбрионов, погибших в течение 4-10 дней. При отсутствии бактериального загрязнения микроскопируют препараты, окрашенные по Романовскому—Гимзе, и определяют в суспензии из желточного мешка наличие группового антигена в РСК. В случае выделения C.trachomatis производят определение серотипа. Для этой цели сыворотку морской свинки, от которой выделен данный штамм, испытывают с прототипными антигенами известных 15 серотипов с помощью метода непрямой иммунофлуоресценции. Для обнаружения хламидий применяют также биологический метод — исследуемым материалом заражают белых мышей и морских свинок, так как некоторые штаммы C.psittaci патогенны для мышей, но не для свинок, и наоборот, некоторые штаммы C.trachomatis (серотипы А, В и С) не размножаются в организме мышей, но патогенны для свинок. Новорожденные мыши погибают при внутримозговом их заражении через 5-10 дней от геморрагического менингита, при интраназальном — через 5-10 дней от пневмонии. У мышей и свинок при внутрибрюшинном заражении увеличиваются печень, селезенка, а в брюшной полости образуется фибринозный экссудат. При микроскопическом исследовании у животных, зараженных разными способами, обнаруживаются микроколонии хламидий в мононуклеарных клетках ликвора (при внутримозговом), легких (при интраназальном), селезенке, печени и в перитонеальном экссудате (при внутри-брюшинном заражении). В связи с тем, что С.pneumoniae плохо размножаются в культурах клеток и куриных эмбрионах, для их обнаружения и идентификации используют моноклональные антитела к видоспецифическому антигену в реакциях иммунофлуоресценции. Для серологической диагностики пситтакоза (орнитоза) и венерического лимфогранулематоза применяют РСК и непрямую иммунофлуоресценцию. Комплементсвязывающие антитела появляются через 4-8 дней в небольшом количестве, затем титр их возрастает. Поэтому РСК лучше ставить с парными сыворотками. В связи с наличием у хламидий родового антигена специфичность и чувствительность серологических реакций может быть повышена на основе использования моноклональных антител и выявленных с их помощью наиболее специфических для каждого вида (и серотипа) антигенов-диагностикумов. Для диагностики хламидиозов могут быть использованы и внутрикожные аллергические пробы, но степень их специфичности зависит от степени специфичности аллергенов, так как могут быть перекрестные реакции за счет общих групповых антигенов. |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям