«Микробиологическая диагностика стафилококковых и стрептококковых инфекций»
|
|
Скачать 2.73 Mb.
|
|
Тема занятия: «Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции, гепатитов B,C,D.» ^
Студент должен знать:
Студент должен уметь:
^
^ 1. Указать правильные ответы в тестовых заданиях. Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) Синдром приобретенного иммунодефицита был впервые выделен в качестве особого заболевания в 1981 г. в США в связи с обнаружением у ряда молодых людей тяжелых заболеваний, возбудителями которых являлись такие микроорганизмы, которые для здоровых людей являются или непатогенными, или слабопатогенными. Исследование иммунологического статуса таких больных выявило у них резкое уменьшение количества лимфоцитов вообще и Т-хелперов в особенности. Это состояние получило название AIDS (от англ. Acquired Immune Deficiency Syndrome — синдром приобретенного иммунодефицита, или СПИД). Способ заражения (половой контакт, через кровь и ее препараты) указывал на инфекционный характер заболевания. ВИЧ шаровидной формы, его диаметр около 100 нм. Оболочка вируса имеет форму многогранника, составленного из 12 пятиугольников и 20 шестиугольников. В центре и углах каждого шестиугольника расположена молекула гликозилированного протеина gpl20 (цифра 120 означает молекулярную массу белка в килодальтонах). Всего на поверхности вириона располагается в виде своеобразных шипов 80 молекул gpl20, каждая из которых связана с внутримембранным белком gp41. Эти белки вместе с двойным липидным слоем образуют суперкапсид (мембрану) вириона. ^ Вирус распознает СО4-рецепторы с помощью своего белка gp 120. Процесс взаимодействия ВИЧ с клеткой протекает по следующей схеме: рецепторопосредованная адсорбция —> окаймленная ямка —> окаймленный пузырек —> лизосома. В ней мембрана вириона сливается с мембраной лизосомы, и нуклеокапсид, освобожденный от суперкапсида, выходит в цитоплазму; на пути к ядру он разрушается, и высвобождаются геномная РНК и ассоциированные с ней компоненты сердцевины. Далее обратная транскриптаза синтезирует на вирионной РНК минус-цепь ДНК, затем РНК-аза Н разрушает вирионную РНК, а вирусная ДНК-полимераза синтезирует плюс-цепь ДНК. На концах ДНК-провируса образуются 5'-LTR и З'-LTR. ДНК-провирус может находиться в ядре некоторое время в неактивной форме, но рано или поздно он с помощью своей интегразы встраивается в хромосому клетки-мишени. В ней провирус находится в неактивном состоянии до тех пор, пока данный Т-лимфоцит не будет активирован микробными антигенами или другими иммунокомпетентными клетками. Пребывание провируса в неактивном состоянии может продолжаться очень долго. Активация вируса является критическим моментом в его взаимодействии с клеткой. С момента инфицирования вирусом клетки начинается период вирусоносительства, который может продолжаться 10 и более лет. С момента активации вируса начинается сама болезнь — ВИЧ-инфекция. С помощью своих регуляторных генов и их продуктов вирус начинает активно размножаться. ^ Вирус иммунодефицита обладает высокой изменчивостью. Даже из организма одного больного могут быть выделены штаммы вируса, существенно отличающиеся друг от друга по антигенным свойствам, но никакой серологической классификации ВИЧ-1 нет. У больных из Западной Африки был выделен новый представитель вирусов СПИДа, биологически близкий ВИЧ-1, но иммунологически отличающийся от него, — ВИЧ-2. ^ ВИЧ-1 и ВИЧ-2 удается культивировать в клетках только одного клона ТСО4-лимфоцитов — Н9, полученного из лейкозных ТСО4-лимфоцитов. Для этих же целей могут быть использованы и монослойные культуры клеток астроцитов, в которых ВИЧ-1 хорошо размножается. Из животных к ВИЧ-1 восприимчивы шимпанзе. Резистентность вируса во внешней среде невелика. Он погибает под влиянием солнечных лучей и УФ-облучения, разрушается при 80 °С в течение 30 мин, при обработке обычно применяемыми дезинфицирующими веществами — в течение 20—30 мин. Для обеззараживания вируссодержащего материала необходимо пользоваться микобактерицидными дезинфицирующими веществами, поскольку они эффективны против микроорганизмов, обладающих самой высокой резистентностью. ^ Источником ВИЧ-инфекции является только человек — больной или вирусоноситель. У них вирус содержится в крови, в сперме, цервикальной жидкости, у кормящих матерей — в грудном молоке. Поэтому заражение происходит половым путем, через кровь и ее препараты, а также от матери к ребенку до родов, во время родов и после родов. Случаи заражения вирусом через пищевые продукты, напитки и через укусы насекомых неизвестны. СПИД стал поистине серьезнейшей проблемой XX века и, по-видимому, XXI века. Зараженность ВИЧ с каждым годом растет. По данным ВОЗ, возбудитель болезни обнаружен в 191 стране мира. Количество зарегистрированных к концу 1993 г. больных ВИЧ-инфекцией составило около 1 млн. В действительности их было не менее 3 млн человек, так как имеются сообщения далеко не обо всех больных. Общее количество инфицированных ВИЧ (вирусоносителей) к этому времени было не менее 12 млн человек, а к 2000 г., по прогнозу ВОЗ, оно может возрасти до 30-40 млн человек. Сложность борьбы с ВИЧ-инфекцией зависит от ряда причин: во-первых, еще нет эффективных методов ее лечения и специфической профилактики, во-вторых, инкубационный период при ВИЧ-инфекции может быть до 10 лет и более. Его продолжительность зависит от того момента, когда наступает активация Т-лимфоцита и содержащегося в его хромосоме ДНК-провируса. До сих пор еще не выяснен вопрос, обречен ли каждый инфицированный вирусом на ВИЧ-инфекцию или возможно длительное вирусоносительство без заболевания (что кажется маловероятным). Наконец, существует группа ВИЧ (ВИЧ-1, ВИЧ-2), антигенное различие между которыми не обеспечивает перекрестного иммунитета. Обнаружение вируса иммунодефицита обезьян (ВИО) пролило некоторый свет на вопрос о происхождении ВИЧ. У ВИО организация генома сходная с ВИЧ, но имеется существенная разница в их нуклеотидных последовательностях. ВИЧ-2 по серологическим свойствам занимает промежуточное положение между ВИЧ-1 и ВИО, а по нуклеотидной последовательности оказался даже ближе к ВИО. В связи с этим В. М. Ждановым было высказано предположение, что все вирусы — ВИЧ-1, ВИЧ-2 и ВИО — произошли от общего предка, а затем эволюционировали самостоятельно. Не исключено, как полагает Р. Галло, что один из ВИО каким-то образом попал в организм человека, где и претерпел ряд мутаций, в результате которых вначале возникли промежуточные варианты вируса, а затем ВИЧ-1, ВИЧ-2 и другие. Особенности патогенеза и клиники ВИЧ-инфекции Вирусу иммунодефицита человека свойственны некоторые особенности, от которых во многом зависит патогенез заболевания. Вирус обладает очень высокой скоростью размножения, определяемой его регуляторными элементами (за 5 мин синтезируется в активной стадии до 5000 вирионов). Благодаря наличию белка слияния (gp41) вирус индуцирует образование обширных синцитиальных структур за счет слияния инфицированных и неинфицированных Т-хелперов, следствием чего является их массовая гибель. Образующиеся в большом количестве молекулы белка gpl20 свободно циркулируют в крови и связываются с рецепторами неинфицированных Т-хелперов, в результате чего они также распознаются и уничтожаются Т-киллерами. Вирус может распространяться по межклеточным каналам из клетки в клетку, в этом случае он становится мало доступен антителам. ^ Одной из основных причин иммунодефицита при ВИЧ-инфекции является массовая гибель Т-хелперов. Она наступает вследствие следующих событий. Во-первых, выходе большого количества вновь синтезированных вирионов у Т-хелперов разрушается мембрана, и они гибнут. Во-вторых, Т-киллеры распознают и разрушают Т-клетки, инфицированные вирусом или несущие на себе адсорбированные молекулы gp 120, а также вирусинфицированные и не зараженные вирусом Т-хелперы, которые образуют симпласты (синцитий), состоящие из нескольких десятков клеток (часть из них погибает в результате размножения в них вирусов). Вследствие разрушения большого количества Т-хелперов происходит снижение экспрессии мембранных рецепторов у В-лимфоцитов к интерлейкину-2, нарушается синтез различных интерлейкинов в результате чего нарушается функция системы Т-киллеров. Происходит подавление активности систем комплемента и макрофагов. Инфицированные вирусом макрофаги и моноциты долго не гибнут, но они не способны удалять вирус из организма. Наконец, из-за структурного и антигенного сходства gpl20 с рецепторами некоторых эпителиальных клеток организма (в том числе с рецепторами трофобластов, опосредующих трансплантационную передачу ВИЧ) происходит синтез антире-цепторных антител с широким спектром действия. Такие антитела способны блокировать различные клеточные рецепторы и осложняют течение болезни аутоиммунными расстройствами. Следствием ВИЧ-инфекции является поражение всех основных звеньев системы иммунитета. Такие больные становятся беззащитными против самых различных микроорганизмов. Это приводит к развитию у них оппортунистических инфекций и опухолевых заболеваний. Для больных ВИЧ-инфекцией повышен риск развития рака по меньшей мере трех типов: саркомы Капоши; карциномы (включая рак кожи); В-клеточной лимфомы, возникающей из-за злокачественного перерождения В-лимфоцитов. Однако ВИЧ обладает не только лимфоцито-, но и нейротропностью. Он проникает в клетки ЦНС (астроциты) как путем рецепторопосредованного эндоцитоза, так и при фагоцитозе астроцитами вирусинфицированных лимфобластов. При взаимодействии вируса с астроцитами также образуются симпласты, способствующие распространению возбудителя по межклеточным каналам. В макрофагах и моноцитах вирус может сохраняться длительное время, поэтому они служат резервуаром и распространителями его в организме, будучи способны проникать во все ткани. Инфицированным макрофагам принадлежит главная роль в заносе ВИЧ в ЦНС и ее поражении. У 10% больных первичные клинические синдромы связаны с поражением ЦНС и проявляются в виде деменции (слабоумия). Таким образом, для людей, пораженных ВИЧ-инфекцией, характерны 3 группы заболеваний — оппортунистические инфекции, опухолевые болезни и поражение ЦНС. ^ У взрослых ВИЧ-инфекцию устанавливают при наличии у них по меньшей мере двух серьезных симптомов в сочетании хотя бы с одним незначительным симптомом и при отсутствии других известных причин иммунодефицита (рак, врожденный иммунодефицит, тяжелая форма голодания и т. п.). К серьезным симптомам относят: а) похудение на 10% и более; б) длительное лихорадочное состояние, перемежающееся или постоянное; в) хроническая диарея. Незначительные симптомы: упорный кашель, генерализованный дерматит, рецидивирующий опоясывающий герпес, кандидоз ротовой полости и глотки, хронический простой герпес, генерализованная лимфоаденопатия. Диагноз СПИДа ставят при наличии одной лишь саркомы Капоши, криптококкового менингита, пневмоцистной пневмонии. На клиническую картину болезни оказывает влияние присоединившаяся оппортунистическая инфекция. ^ Основным способом диагностики вирусоносительства и ВИЧ-инфекции является иммуноферментный метод. Для этой цели существуют различные тест-системы, с помощью которых обнаруживаются антитела к ВИЧ. Однако в связи с тем, что gpl20 имеет структурное и антигенное сходство с рецепторами некоторых клеток человека, в том числе с рецепторами, которые осуществляют транспорт иммуноглобулинов через эпителиальные клетки слизистых оболочек, в организме могут появляться антитела, родственные антителам против gpl20. В этом случае могут быть ложнопозитивные результаты ИФМ. Поэтому все положительно реагирующие сыворотки исследуемых подвергаются дополнительному анализу с помощью метода иммуноблотинга, или вестернблотинга. В основе этого метода лежит идентификация исследуемых антител после электрофоретического разделения их и последующего тестирования с помощью меченых антивидовых антител. Вирусологический метод мало применяется из-за сложности культивирования вируса. Клон лимфоцитов Н9 используется для получения вирусных антигенов — необходимых компонентов диагностических тест-систем. ^ Многочисленные попытки получить эффективные лечебные препараты пока оказались безуспешными. Задача заключается в том, чтобы найти такой препарат, который прежде всего подавлял бы активность обратной транскриптазы, что исключает возможность образования ДНК-провируса и интеграцию его в хромосому клетки. Ведется также поиск препаратов, которые бы избирательно угнетали какую-либо другую стадию репродукции вируса. Пока единственным препаратом, который позволяет задержать на какое-то время развитие ВИЧ-инфекции, является азидотимидин (ретровир). Являясь аналогом нуклеотида тимидина, он включается в растущую цепь ДНК провируса и блокирует ее дальнейший синтез. Лечение азидотимидином продлевает жизнь больным ВИЧ-инфекцией в среднем на 1,5-2 года, но к этому препарату у ВИЧ-1 и ВИЧ-2 вырабатывается резистентность. ^ заключается в получении высокоэффективной вакцины. Такая вакцина должна отвечать по крайней мере трем следующим условиям: а) быть абсолютно безопасной; б) стимулировать накопление В-лимфоцитов, способных синтезировать вируснейтрализующие антитела; в) стимулировать активность Т-цитотоксических лимфоцитов. Вакцина может быть получена из убитых (инактивированных) вирусов или из отдельных антигенов с высокими протективными свойствами. Такие антигены могут быть либо выделены из самого вириона, либо синтезированы химически. Создана также вакцина на основе методов генной инженерии — рекомбинантный вирус осповакцины, несущий гены ВИЧ, ответственные за синтез обладающих высокой иммуногенностью антигенов. Решение вопроса об эффективности этих вакцин требует значительного времени из-за большой продолжительности инкубационного периода и высокой изменчивости возбудителя. ^ Вирусные гепатиты — группа заболеваний с общими клиническими синдромами — представляют собой серьезнейшую глобальную проблему. Только гепатитом А ежегодно в СССР заболевало более 1 млн человек. Сколько человек ежегодно инфицируется вирусом гепатита В, сказать трудно, во всяком случае не менее 50 млн человек. Если еще несколько лет тому назад в мире насчитывалось примерно 200 млн носителей вируса гепатита В, то теперь, по данным ВОЗ, носителей вируса гепатита В в мире более 1 млрд человек. Гепатит А занимает по уровню заболеваемости и причиняемому экономическому ущербу одно из первых мест среди инфекционных болезней человека. Впервые инфекционный гепатит был выделен в самостоятельную нозологическую единицу в 1888 г. выдающимся русским врачом С. П. Боткиным. Он сумел дифференцировать инфекционный гепатит (катаральную желтуху) от других болезней печени, сопровождающихся желтухой. Поэтому в нашей стране инфекционный гепатит в течение многих десятилетий называли болезнью Боткина. Заражение инфекционным гепатитом происходит фекально-оральным путем. Однако, начиная с ЗО-х годов XX в., а именно после того, как начались массовые заболевания желтухой среди привитых против желтой лихорадки, стало ясно, что существуют две этиологически и эпидемиологически разные формы гепатита, одну из них назвали инфекционным гепатитом, а другую — сывороточным, поскольку заражение в последнем случае связывали с парентеральными манипуляциями. Следует сказать, что название «сывороточный гепатит» явно не совсем удачное, так как последний тоже является инфекционным заболеванием, как и инфекционный гепатит. Поэтому еще в 1947 г. Ф. Мак-Каллум предложил называть инфекционный гепатит гепатитом А, а сывороточный гепатит — гепатитом В. Это предложение было узаконено ВОЗ только в 1973 г. В 1974 г. была выделена еще одна форма вирусного гепатита, а именно гепатит ни А ни В, а в 1977 г. был обнаружен возбудитель дельта-гепатита. Тот факт, что инфекционный и сывороточный гепатиты вызываются вирусами, был установлен давно в опытах на добровольцах, однако их истинные возбудители были обнаружены в 70-х годах XX в. Это обусловлено тем, что, во-первых, указанные вирусы долгое время не удавалось выращивать в культурах клеток, во-вторых, долгое время не могли обнаружить восприимчивых к ним животных. Вирусный гепатит А Вирусный гепатит А — инфекционная болезнь человека, характеризующаяся преимущественным поражением печени и проявляющаяся клинически интоксикацией и желтухой. Вирус гепатита А был обнаружен в 1973 г. С. Фейнстоном с соавт. с помощью метода иммунной электронной микроскопии и путем заражения обезьян — шимпанзе и мармозет. Суть метода иммунной электронной микроскопии состоит в том, что к фильтрату испражнений больного гепатитом А добавляют специфические антитела (сыворотку реконвалесцента) и осадок подвергают электронной микроскопии. Благодаря взаимодействию вирусов со специфическими антителами они подвергаются специфической агрегации. Их в этом случае легче обнаружить, а агрегация под влиянием антител подтверждает специфичность возбудителя. Открытие С. Фейнстона было подтверждено в опытах на добровольцах. Вирус гепатита А имеет сферическую форму, диаметр вириона — 27 нм. Суперкапсид отсутствует. Тип симметрии кубический — икосаэдр. Капсид имеет 32 капсомера, он образован четырьмя полипептидами. По своим свойствам вирус гепатита А отнесен к роду Enterovirus, семейству Picornaviridae (энтеровирус 72). В антигенном отношении вирус гепатита A (HAV — hepatitis A virus) является однородным. HAV хорошо размножается в организме шимпанзе, павианов, гамадрилов и игрунковых обезьян мармозет. Длительное время вирус не умели культивировать. Лишь в 80-х годах удалось получить культуры клеток, в которых HAV размножается. Вначале для этих целей использовали перевиваемые линии клеток почки эмбриона макаки-резус, а сейчас — перевиваемую линию клеток почек зеленых мартышек. Резистентность. Вирус относительно устойчив к высокой температуре, кислотам, жирорастворителям (отсутствуют липиды), дезинфицирующим средствам, хорошо переносит низкую температуру. Все это способствует длительному сохранению его во внешней среде. При комнатной температуре он выживает несколько недель, при 60 °С частично утрачивает инфекциозность через 4-12 ч, полностью — через несколько минут при 85 °С. Высоко резистентен к хлору, благодаря чему способен проникать в водопроводную воду через барьеры водоочистных сооружений. Эпидемиология. Вирус гепатита А обладает высокой патогенностью для человека. По заключению ВОЗ (1987 г.), для возникновения болезни достаточно заражения всего одним вирионом. Однако практическая заражающая доза, вероятно, значительно выше. Источником инфекции является только инфицированный человек. Вирус выделяется в большом количестве с испражнениями за 12-14 дней до появления желтухи и в течение 3-х недель желтушного периода. Существенных различий в выделении возбудителя у больных желтушными, безжелтушными и бессимптомными формами гепатита А не выявлено. Способ заражения — фекально-оральный, главным образом водный, а также бытовым и пищевым путем. Водный путь является основным (первичным) путем передачи вируса. Возможно также заражение воздушно-капельным путем. Восприимчивость населения всеобщая. Болеют преимущественно дети в возрасте до 14 лет. Болезнь имеет выраженную осенне-зимнюю сезонность. ^ Инкубационный период варьирует от 15 до 50 дней, но в среднем составляет 28—30 дней, что зависит от величины заражающей дозы вируса. Попав в организм, вирус гепатита А размножается в регионарных лимфатических узлах, проникает в кровь, а затем в клетки печени и вызывает острый диффузный гепатит, который сопровождается поражением гепатоцитов и ретикуло-эндотелиальных элементов печени и снижением ее дезинтоксикационной и барьерной функций. Поражение клеток печени приводит к нарушению белкового, углеводного и пигментного обмена, к увеличению количества некоторых ферментов в сыворотке крови (альдолазы, аминотрансфераз и др.). Наиболее типичной картиной гепатита А является острая желтушная циклическая форма: инкубационный период, продромальный (преджелтушный), желтушный период и реконвалесценция. Однако в очагах инфекции выявляется большое количество больных с безжелтушными и бессимптомными формами инфекции, число которых значительно преобладает над желтушными («феномен айсберга»). Постинфекционный иммунитет прочный и длительный, обусловлен вируснейтрализующими антителами и клетками иммунной памяти. ^ Для диагностики гепатита А (кроме заражения животных — шимпанзе, мармозет, павианов, которых у нас нет) предложены различные иммунологические методы: РСК, иммунофлуоресцентный метод, гемагглютинация иммунного прилипания (комплекс вирусный антиген + антитело в присутствии комплемента адсорбируется на эритроцитах и вызывает их склеивание). Однако возможности применения этих методов ограничены из-за отсутствия специфических вирусных антигенов, а реакция иммунофлуоресценции требует биоптатов печени, что нежелательно. Надежным и специфическим является метод иммунной электронной микроскопии, однако он очень трудоемкий. Поэтому пока единственной приемлемой иммунологической реакцией является метод иммуносорбентного анализа твердой фазы в виде ИФМ или РИМ, особенно в модификации «захвата» иммуноглобулинов класса М. ^ В течение многих лет для борьбы с гепатитом А использовали метод плановой гаммаглобулиновой профилактики с помощью стандартного иммуноглобулина, который готовится из сыворотки плацентарной и абортной крови. Однако такая пассивная серопрофилактика не привела к снижению заболеваемости гепатитом А. Поэтому ныне основной упор делается на проведение специфической вакцинопрофилактики. С этой целью разрабатываются следующие типы вакцин:
Лицам, находившимся в тесном контакте с больным гепатитом, рекомендуется экстренная гаммаглобулинопрофилактика. Лечение. Специфическое лечение отсутствует. Применяют препараты, обладающие дезинтоксикационными свойствами и способствующие улучшению функции печени, а также диетотерапию. Вирусный гепатит В Гепатит В — инфекционное заболевание человека, характеризующееся избирательным поражением печени вирусом. Эта форма гепатита является наиболее опасной по своим последствиям среди всех известных форм вирусных гепатитов. Его возбудителем является вирус гепатита В (HBV). ^
В составе вируса гепатита В нет онкогена, однако установлено, что, внедряясь в клеточную хромосому (в разные ее участки), вирусная ДНК может индуцировать в них различные генетические перестройки — делеции, транслокации, амплификации, которые и могут стать причиной развития рака печени — одного из самых тяжких последствий вирусного гепатита В. Резистентность. Вирус гепатита В обладает высокой устойчивостью. При комнатной температуре сохраняет жизнеспособность в течение 3 мес, в замороженном состоянии — несколько лет. Вирус полностью инактивируется при автоклавировании (120 °С), при кипячении в течение 30 мин, сухим жаром при 180 °С в течение 60 мин, при 60 °С — в течение 10 час. Устойчив в кислой среде, но разрушается в щелочной. Вирус погибает при обработке Н2О2, хлорамином, формалином, фенолом и при УФ-облучении. Эпидемиология. Источником заражения вирусом гепатита В является только человек. Вопреки прошлым представлениям о том, что заражение вирусом гепатита В происходит исключительно парентеральным путем, теперь доказано, что он обнаруживается в различных секретах и экскретах: в слюне, носоглоточных выделениях, испражнениях, слезной жидкости, в сперме, менструальной крови и прочих. Таким образом, заражение происходит не только парентеральным путем, но и половым и вертикальным (от матери плоду), т. е. практически заражение вирусом гепатита В возможно разными способами. Распространению HBV способствует большое число вирусоносителей, которые, по данным ВОЗ, составляют от 0,1 до 20% населения страны или региона. ^ Вирус гематогенным путем заносится непосредственно в печень. В патогенезе гепатита важную роль играют аутоиммунные гуморальные и клеточные реакции. Предполагается, что поражение гепатоцитов связано не столько с непосредственным действием самого вируса, сколько с иммунологическими реакциями хозяина, возникающими в связи с модификацией клеточной мембраны вирусными белками, которые индуцируют появление аутоантител к клеткам печени. Поэтому развивающийся хронический гепатит и цирроз печени можно рассматривать как аутоиммунное заболевание. Клеточные аутоиммунные реакции к вирусным белкам, содержащимся в мембране гепатоцитов, опосредуются Т-цитотоксическими лимфоцитами и другими киллерными клетками печени. Поэтому острую трофию печени можно рассматривать как реакцию отторжения своеобразного гетеротрансплантата. Инкубационный период длится от 45 до 180 дней, в среднем составляет 60-90 дней. Клиническое течение гепатита В характеризуется большим разнообразием; болезнь может протекать: в латентной форме, выявляемой лишь лабораторными методами, в типичной желтушной форме и в злокачественной форме, заканчивающейся летально. Продолжительность преджелтушной стадии составляет от >го дня до нескольких недель. Желтушный период, как правило, длительный и характеризуется хорошо выраженными симптомами (желтуха, гипербилирубинемия, потемнение мочи, желтушность склер). Затяжная форма наблюдается у 15-20% больных, а у 90% из них развивается хронический гепатит В. У больных с затяжной формой нередко наблюдаются аутоиммунные процессы, сопровождающиеся повышенным содержанием противопеченочных антител, которые выявляются с помощью иммуносорбентного анализа (ИФМ). У детей гепатит В протекает в более легкой форме и часто без развития желтухи, у детей младшего возраста — преимущественно бессимптомно. ^ длительный, пожизненный, обусловлен вируснейтрализующими антителами (анти-HBsAg) при отсутствии в крови поверхностного антигена. Нередко наблюдается скрытая иммунизация вследствие повторного контакта с HBV, которая является причиной широкого распространения иммунитета к вирусу среди населения. Обычно больные с острой формой гепатита В выздоравливают полностью по мере накопления антител к нему. Однако в некоторых случаях, несмотря на высокий уровень вирусного антигена в крови (обстоятельство, объясняющее, почему парентеральное заражение происходит наиболее часто), антитела к нему не вырабатываются. Вирус сохраняется в печени, и человек на долгое время, иногда пожизненно, становится хроническим носителем. Это обстоятельство связано, очевидно, со слабым иммунным ответом. Одним из наиболее частых исходов хронического гепатита В является цирроз печени и рак печени, который развивается по истечении латентного периода продолжительностью до 30-50 лет. ^ В настоящее время основным методом диагностики гепатита В является использование реакции обратной пассивной гемагглютинации (РОПГА) для обнаружения вируса или его поверхностного антигена. Как уже отмечалось, в крови поверхностного антигена содержится во много раз больше, чем самого вируса (в 100—1000 раз). Для реакции РОПГА используют сенсибилизированные антителами против вируса гепатита В эритроциты. При наличии антигена в крови происходит реакция гемагглютинации. Реакция проста и удобна и обладает высокой специфичностью. Кроме того, разработан метод зонда — ДНК-ДНК-гибридизации. Для обнаружения в сыворотке больного антител к вирусному антигену (HBsAg) могут быть использованы различные иммунологические методы (РСК, РПГА, реакция преципитации, ИФМ, РИМ и др.). ^ Принимая во внимание, что последствия перенесенного гепатита В могут быть очень тяжелыми, а также то обстоятельство, что в мире очень много носителей HBV, по рекомендации ВОЗ прививки против гепатита В являются обязательными и должны проводиться на первом году жизни. Для вакцинации предложено два типа вакцин. Для приготовления одной из них в качестве сырья используют плазму вирусоносителей, поскольку в ней вирусный антиген содержится в количествах, достаточных для приготовления вакцины. Главное условие для приготовления этого типа вакцин — их полная безопасность, т. е. полная инактивация вируса, что и предусматривается технологией приготовления вакцины. Для изготовления вакцины другого типа применяют методы генной инженерии, в частности, для получения антигенного материала используют рекомбинантный клон дрожжей, вырабатывающих поверхностный антиген вируса гепатита В. Обе вакцины обладают высокой эффективностью (защищают 95% привитых). Продолжительность поствакцинального иммунитета не менее 5-6 лет. К настоящему времени в мире привито несколько десятков миллионов детей. Массовая иммунизация новорожденных и детей раннего возраста — наиболее важный компонент борьбы с гепатитом В в глобальном плане. Полный курс прививки состоит из 3 инъекций: I доза — сразу после рождения; II доза — через 1-2 мес; III доза — до конца 1-го года жизни. Эти прививки включены в расширенную программу иммунизации ВОЗ и совмещаются с календарем ее проведения (по рекомендации ВОЗ на 1-м году жизни проводят прививки против туберкулеза, полиомиелита, гепатита В, кори, столбняка, дифтерии, коклюша). Гамма-глобулин, содержащий антитела против HBV, применяют для экстренной пассивной иммунопрофилактики лицам, имевшим контакт с больным гепатитом В. Лечение гепатита В проводится так же, как и гепатита А, с учетом формы и тяжести заболевания. Вирусный гепатит С Гепатит С — инфекционное заболевание человека с парентеральным механизмом заражения, характеризующееся преимущественным поражением печени. Возбудитель — вирус гепатита С (HCV) — еще не выделен в чистом виде, но на основании изучения ряда его свойств отнесен к семейству Flaviviridae. Вирион имеет суперкапсид (чувствителен к хлороформу). Геном вируса гепатита С изучен с помощью сложных генно-инженерных исследований. Изучение геномной организации нескольких штаммов HCV показало, что геном вируса гепатита С не является близко родственным ни одному из известных РНК-содержащих вирусов, однако его ближайшими родственниками являются флавивирусы. Изучение свойств HCV затрудняется тем, что его пока не удается выращивать в культурах клеток. Экспериментальное заражение воспроизводят на шимпанзе. ^ Источником инфекции является только человек. Распространение вируса происходит трансфузионно при переливании крови и ее препаратов или инструментальным путем в результате занесения зараженной вирусом крови в организм здоровых людей, а также вертикально — от матери плоду. Восприимчивость населения к HCV очень высокая. По данным ВОЗ (1987 г.), на долю гепатита С в Африке приходится до 25% всех случаев вирусного гепатита, в ряде стран Америки — до 35%. В США около 90% посттрансфузионного вирусного гепатита вызывается вирусом гепатита С. Поддержанию эпидемического процесса способствует склонность гепатита С к хроническому течению. Вирус выделяется от больных в течение одной или нескольких недель до появления признаков болезни и до 10 нед после начала болезни. Инкубационный период по сравнению с гепатитом В короче примерно на один месяц и составляет в среднем 6-8 нед. Клиническая картина сходна с таковой при гепатите В, однако заболевание протекает легче и характеризуется относительно быстрым выздоровлением, нередко оно протекает без желтухи; последняя наблюдается примерно у 25% больных. Несмотря на относительно благоприятное течение, около 50% всех форм инфекции приводят к формированию хронического гепатита, а около 20% хронических поражений печени заканчивается циррозом и раком. Наряду с вирусом гепатита В, вирус гепатита С является одной из главных причин рака печени. Диагностика. В крови HCV циркулирует в очень малых концентрациях, в связи с чем обнаружить его с помощью обычных скрининговых методов удается с большим трудом. Поэтому для диагностики вирусного гепатита С разработаны различные тест-системы, позволяющие определять антитела к специфическим вирусным белкам с помощью иммуноферментного метода. |
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям