Приказ Минздрава России от 09. 01. 1998г. №2 инструкция по предупреждению несовместимости при переливании крови I. Введение > 1 icon

Приказ Минздрава России от 09. 01. 1998г. №2 инструкция по предупреждению несовместимости при переливании крови I. Введение > 1





Скачать 2.36 Mb.
Название Приказ Минздрава России от 09. 01. 1998г. №2 инструкция по предупреждению несовместимости при переливании крови I. Введение > 1
страница 7/10
Дата 20.03.2013
Размер 2.36 Mb.
Тип Инструкция
1   2   3   4   5   6   7   8   9   10

^ 4. Контроль специфичности


Для контроля специфичности при каждом исследовании (независимо от применяемой методики) необходимо использовать стандартные D-положительные и D-отрицательные эритроциты.


^ 5. Форма выпуска


ЦОЛИКЛОН Анти-D Супер выпускается в жидкой форме во флаконах объемом 2,5 или 10мл (1 мл содержит 10 доз). В качестве консерванта применяется азид натрия в конечной концентрации 0,1%.

Срок хранения - одингод в холодильнике при 2-8°С. Вскрытый флакон можно хранить в холодильнике в течение одного месяца в закрытом виде.


6. Рекламация


Основаниями для рекламации являются: отсутствие активности,неспецифичность,нарушение целостности флаконов, получение реагента с истекшим сроком годности или недостаточными сведениями.

При составлении рекламации необходимо указать дату получения, номер серии, причины, по которым реагент признан негодным, протокол с результатами проверки реагента. Вместе с рекламацией направляют 2-3 невскрытых флакона данной серии.

Рекламацию слудет напрвить на предприятие-изготовитель.


Приложение 11

УТВЕРЖДЕНО

Приказ Минздрава России

от 09.01 1998г. № 2


^ ИНСТРУКЦИЯ ПО ИССЛЕДОВАНИЮ СЫВОРОТКИ НА НАЛИЧИЕ РЕЗУС-АНТИТЕЛ


II. ВВЕДЕНИЕ


Резус-антитела относятся к так называемым аллоиммунным антитела, они не являются нормальным свойством сыворотки человека, а появляются в крови резус-отрицательных людей лишь при особых случаях.

Условиями, способствующими образованию резус-антител, являются введение резус-отрицательному человеку резус-положительной крови крови или беременность резус-отрицательной женщины резус-положительным плодом.

Определение резус-антител наряду с определением резус-принадлежности больного и донора необходимо для предупреждения переливания резус-несовместимой крови, в также для диагностики возможного заболевания плода или новорожденного гемолитической болезнью.

Определение резус-антител требуется также при подготовке материала в целях использования для приготовления сывороток антирезус.

Резус-антитела бывают разные по специфичности: анти-D, анти-С, анти-Е, анти-с, анти-е: и по форме полные и неполные. Специфичность антител определяется тем, с каким из антигенов они реагируют. Форма антител определяется тем, каким образом они реагируют с эритроцитами, содержащими специфические для них резус-антигены.

Полные антитела, соединяясю с резус-антигенами эритроцитов, вызывают агглютинацию этих эрироцитов при реакции в солевой среде. Неполные антитела в этих условиях лишь соединяются с эритроцитами, но не вызывают агглютинации, так что внешне эта реакция ничем не проявляется.

Для того, чтобы установить, произошла ли реакция между неполными резус-антителами и эритроцитами, необходимы специальные условия, в частности, добавление различных коллоидов (желатин, полиглюкин), или использование сыворотки для пробы Кумбса, реагирующей с человеческим белком (непрямая проба Кумбса). При всех перечисленных условиях реакция между резус-антителамит и эритроцитами, содержащими резус-антиген, в конечном итоге также проявляется в виде агглютинации эритроцитов.

Разные методы определения резус-антител требуют радличных оптимальных для них температурных условий.


^ II. ОБЩИЕ ЗАМЕЧАНИЯ


1. Учет специфичности антител. Специфичность стандартных эритроцитов

Наиболее часто при иммунизации резус-отрицательных людей повторными трансфузиями крови или беременностями образуются антитела анти-D, но при этих же условиях могут образоваться и другие резус-антитела. Поэтому при определении антител в сыворотке крови человека эту сыворотку испытывют с резус-положительными эритроцитами, обязательно содержащими антигены резус: D, C, E, c, e.

Если антигены С и Е в эритроцитах специально не определялись, то число резус-положительных образцов должно быть не менее 20 для того, чтобы среди них обязательно встретились антигены резус.

В качестве контроля на специфичность реакции, а также для выявления антител анти-с и е в исследование включаются стандартные резус-отрицательные - ccddee эритроциты и, если возможно, собственные эритроциты лица, сыворотка которого испытывается.

Такое исследование является предварительным. Для уточнения специфичности требуются дополнительные специальные исследования. (см.п.IX).


2. Учет формы антител

Чаще всего при иммунизации резус-антигеном образуются неполные антитела; иногда одновременно с ними образцются и полные. Кроме того, встречаются случаи, в которых у человека образуются только полные резус-антитела.

Поэтому определение резус-антител следует производить не менее, чем двумя методами, одним из которых обязательно должен быть метод солевой агглютинации, выявляющий полные антитела, а другим - любой метод, выявляющий неполные антитела.


^ III. О ВЫБОРЕ МЕТОДА ВЫЯВЛЕНИЯ РЕЗУС-АНТИТЕЛ


Ниже в п. IV, V, VI, VII описаны различные методы исследования сывороток. Из них непрямая проба Кумбса (см.IV), реакция с применением желатина (см.V) и реакция с применением полиглюкина (см.VI) выявляют неполные резус-антитела, и для этой цели может быть использован любой из них.

Метод исследования сыворотки в солевой среде (см.VII) выявляет полные резус-антитела и должен обязательно использоваться одновременно с любых из упомянутых выше.


^ IV. ИССЛЕДОВАНИЕ СЫВОРОТКИ НА НАЛИЧИЕ НЕПОЛНЫХ РЕЗУС-АНТИТЕЛ НЕПРЯМОЙ ПРОБОЙ КУМБСА


1. Предварительная обработка стандартных эритроцитов

Кровь для приготовления эритроцитов дерут в количестве 0,5-1 мл в обычные пробирки емкостью неменее 10 мл, содержащие 0,25 мл изотонического раствора лимоннокислого натрия. Пробирки нумеруют и пишут на них фамилию, инициалы, группу крови и резус-принадлежность лица, от которого взятоа кровь. Пробирки доливают доверху изотоническим раствором NaCl, затем содержимое пробирок перемешивают, центрифугируют и отсасывают отмывную жидкость. Такое отмывание повторяют дважды. После отмывания на дне пробирки остаются отмытые эритроциты, которые и применяют для исследования сыворотки.


2. Техника исследования

а. В штатив устанавливают и нумеруют пробирки высотой 4-10 см с внутренним диаметром 0,5-0,8 см (первые размеры удобнее). Число и нумерация пробирок должны соответствовать числу и нумерации образцов эритроцитов, с которыми исследуется сыворотка.

б. Во все пробирки вводят по три капли (0,15 мл) испытуемой сыворотки.

в. Со дна каждой пробирки, содержащей отмытые стандартные эритроциты, очень тонкой пастеровской пипеткой набирают маленькую каплю (0,01 мл) эритроцитов и переносят ее в пробирку с испытуемой сывороткой согласно нумерации пробирок.

г. Содержимое пробирок тщательно перемешивают путем встряхивания и помещают для инкубации в термостат на 45 мин. при температуре +37°С. За это время резус-антитела, если они имеются в испытуемой сыворотке, фиксируются на эритроцитах.

д. После инкубации в пробирки доливают доверху изотонический раствор NaCl, содержимое пробирок перемешивают и центрифугируют, после чего надосадочную жидкость отсасывают. Такое отмывание эритроцитов повторяют 3-4 раза.

е. В кажду пробирку к отмытым таким образом эритроцитам добавляют 4-7 капель изотонического раствора NaCl для получения 5% взвеси (так как при отмывании эритроциты частично захватываются, интенсивность взвеси контролируют глазом).

ж. Одну каплю (0,05 мл) взвеси эритроцитов из каждой пробирки переносят на белую фарфоровую или любу другую белую плстинку со смчиваемой поверхностью и к каждой капле прибаляют по одной капле (0,05 мл) сыворотки, приготовленной для пробы Кумбса.

з. Сыворотку тщательно перемешивают с эритроцитами (стеклянной палочкой или углом прдметного стекла), после чего пластинку слегка покачивают. При этом наблюдают результат (наличие или отсутствие агглютинации эритроцитов.

Агглютинация обычно начинается в течение первых 10-30 век., но при слабом титре резус-антител может наступить до 20 мин.


3. Трактовка результата.

Наличие агглютинации в каплях с образцами резус-положительных эритроцитов и отсутствие ее с резус-отрицательными и собственными эритроцитами указывает на присутствие в сыворотке неполныхрезус-антител.

Отсутствие агглютинации со всеми образцами эритроцитов указывает на то, что неполные резус-антитела - анти-D, C, E, c и e- не выявлены.

Определение специфичности выявленных антител см.п.IX.


4. Титрование сыворотки, содержащей неполные резус-антитела.

а. В штатив устанавливают 10 пробирок с обозначениями 1:2,1:4,1:8 и т.д. до 1:1024.

б. Во все пробирки вводят по три капли (0,15 мл) изотонического раствора NaCl.

в. В первую пробирку (с обозначением 1:2) вводят три капли (0,15 мл) исследуемой сыворотки. Из первой пробирки после перемешивания ее содержимого переносят три капли в следующую и т.д. до последней пробирки, из которой три капли удаляют. В результате в пробирках получаются разведения испытуемой сыворотки от 1:2 до 1:1024.

г. Во все пробирки добавляют пастеровской пипеткой по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных резус-положительных эритроцитов или смеси эритроцитов, полученных от 4-5 резус-положительных лиц и приготовленных так же, как готоаят стандартные эритроциты.

д. Содержимое пробирок перемешивают и штатив помещают на 45 мин. в термостат при температуре +37°С.

е. После инкубации эритроциты отмывают и из них готовят 55 взвесь. Затем из каждой пробирки переносят одну каплю (0,05 мл) взвеси на белую пластинку и к каждой капле взвеси прибавляют одну каплю (0,05 мл) сыворотки для пробы Кумбса, которую смешивают с эритроцитами. Далее в течение пяти минут наблюдают результат при покачивании пластинки.

ж. Последнее разведение, в котором наблюдается агглютинация (время наблюдения 5 мин.) принимается за титр выявленных неполных резус-антител. Если агглютинация эритроцитов наблюдается во всех разведениях сыворотки, то, следовательно, титр резус-антител выше 1:1024. В этих случаях следует продолжить разведение сыворотки и даже продолжать исследование, как сказано выше.


^ V. ИССЛЕДОВАНИЕ СЫВОРОТКИ НА НАЛИЧИЕ НЕПОЛНЫХ РЕЗУС-АНТИТЕЛ С ПРИМЕНЕНИЕМ ЖЕЛАТИНА


1. Предварительная обработка стандартных эритроцитов.

Кровь для приготовления эритроцитов берут не более, чем за 2-3 дня до исследования в количестве 3-5 мл в обычные пробирки без стабилизатора. Пробирки нумеруют и пишут на них фамилию, инициалы, группу крови и резус-принадлежность лица, от которого взята кровь При этом обычно после свертывания крови на дне пробирки остается небольшое количество эритроцитов, которые и применяют для исследования. Эритроциты берут со дна пробирки пастеровской пипеткой; если при этом захватывается небольшое количество собственной сыворотки, это не влияет на ход реакции.

Если эритроцитов,оставшихся свободными после свертывания крови, недостаточно,то допускается интенсивное встряхивание свертка для отделения дополнительного количества эритроцитов.

Можно брать кровь с цитратом натрия. В этом случае эритроциты необходимо отмыть изотоническим раствором NaCl.

Для установления титра антител эритроциты готовят ex tempore. В пробирку к одной части эритроцитов добавляют 9 частей 10% раствора желатина, подогретого до разжижения. При этом получается 10% взвесь эритроцитов в желатине.


2. Техника исследования

а. В штатив устанавливают тонкостенные пробирки высотой около 10 см, которые нумеруют. Число инумерация пробирок должны соответствовать числу и нумерации образцов эритроцитов, с которыми исследуется сыворотка.

б. В пробирки в соответствии с их нумерацией вводят по одной капле (0,05 мл) эритроцитов, приготовленыых в качестве стандартов.

в. Во все пробирки прибавляют по две капли (0,1 мл 10% раствора желатина, подогретого до разжижения. (Раствор желатина необходимо тщательно просмотреть перед применением. При помутнении или появлении хлопьев, а также при потере свойства застудневать при температуре 4-8°С желатин не пригоден).

г. После этого во все пробирки вводят по 1-2 капли (0,1 мл) испытуемой сыворотки, пробирки встряхивают для перемешивания их содержимого и помещают в водяную баню при температуре 46-48°С на 15 минут или в суховоздушный термостат на 45 мин.

д. В пробирки по извлечении из водяной бани наливают 5-8 мл изотонического раствора NaCl. Содержимое пробирок перемешивают путепм одно-двукратного перевертывания их и наблюдают результат в виде наличия или отсутствия агглютинации эритроцитов.


3. Трактовка результат

Результат реакции просматривают на свет.

Содержимое пробирок, в которых при просмотре невооруженным глазом агглютинация не видна, необходимо микроскопировать.

Для этого каплю содержимого пробирки помещают с помощью стеклянной палочки напредметное стекло и просматривают под малым увеличением.

Наличие агглютинации в пробирках с образцами резус-положительных эритроцитов и отсутствие ее с резус-отрицательными и собственными эритроцитами указывает на содержание в испытуемой сыворотке неполных резус-антител.

Отсутствие агглютинации со всеми образцами эритроцитов указывает на то, что неполные резус-антитела анти-D, C, E, а также c и e - не выявлены.

Определение специфичности вывленных антител см п.IX.


4. Титрование сыворотки, содержащей неполные резус-антитела

а. В штатив устанавливают 10 пробирок с обозначениями 1:2, 1:4, 1:8 ит.д.до 1:1024.

б. Во все пробирки вводят по две капли (0,1 мл) изотонического раствора NaCl.

в. В первую пробирку этой же пипеткой вводят две капли (0,1 мл) исследуемой сыворотки. Из первой пробирки после перемешивания две капли переносят во вторую, из второй - в третью, из третьей - в четвертую и так до последнй пробирки, из которой две капли удаляют. В результате в пробирках получаются разведения сывороток от 1:2 до 1:1024.

г. Во все пробирки добавляют по две капли стандартных резус-положительных эритроцитов или смеси эритроцитов, полученных от 4-5 резус-положительноых лиц и приготовленных, как сказано выше в виде 10% взвеси в желатине.

д. Пробирки встряхивают и помещают в водяную баню при температуре +46-48°С на 10 мин. или в суховоздушный термостат на 30 мин.

е. По извлечении пробирок из водяной бани в них доливают по 5-8 капель изотонического раствора NaCl и наблюдают результат. Последнее разведение, в котором наблюдается агглютинация, принимается за титр выявленных неполных резус-антител.

Если агглютинация эритроцитов наблюдается во всех разведениях сыворотки, то, следовательно,титр резус-антител выше 1:1024. В этих случаях следует продолжать разведение сыворотки и далее продолжать исследование, как сказано выше.


^ VI. ИССЛЕДОВАНИЕ СЫВОРОТКИ НА НАЛИЧИЕ НЕПОЛНЫХ АНТИТЕЛ С ПРИМЕНЕНИЕМ ПОЛИГЛЮКИНА (В ПРОБИРКАХ БЕЗ ПОДОГРЕВА)


1. Предварительная обработка стандартных эритроцитов

Кровь для приготовления эритроцитов берут более чем за 2-3 дня до исследования в обычные пробирки. Пробирки нумеруют и пишут фамилию, инициалы, группу крови и резус-принадлежности лица, от которого взята кровь. Может быть использована любая кровь: непосредственно взятая из пальца, эритроциты из осадка в пробирке после образования свертка и консервированная, отмытая изотоническим раствором NaCl.


2. Техника исследования

а. В штатив устанавливают пробирки вместимостью 8-10 мл, которые нумеруют. Число и нумерация пробирок должны соответствовать числу нумерации образцов эритроцитов, с которыми исследуется сыворотка.

б. Во все пробирки вводят по две капли исследуемой сыворотки.

в. Согласно нумерации в пробирки вводят по одной капле стандартных эритроцитов.

г. Во все пробирки вводят по одной капле 33% раствора полиглюкина.

д. Пробирки встряхивают для перемешивания их содержимого, затем наклоняют почти до горизонтального положения и медленно поворачивают по горизонтальной оси так, чтобы содержимое растекалось по их стенкам. Контакт эритроцитов с исследуемой сывороткой при поворачивании пробирок продолжают три минуты.

е. Через 3-5минут в пробирки наливают 3-4 мл изотонического раствора NaCl, осторожно перемешивают соджержимое путем 2-3 кратного перевертывания пробирки (не встряхивать!) и наблюдают результат в виде наличия или отсутствия агглютинации эритроцитов.


3. Трактовка результата

Результаты просматривают на свет невооруженным глазом.

Наличиеагглютинации в пробирках собразцами резус-положительных эритроцитов и отсутствие ее с резус-отрицательными и собственными эритроцитами указывает насодержание в исследуемой сыворотке резус-антител.

Отсутствие агглютинации со всеми образцами эритроцитов указывает на то, что неполные антитела анти-D, С, Е, а также с и е не выявлены.

Определение специфичности антител см п. IX.


^ VII. ИССЛЕДОВАНИЕ СЫВОРОТКИ НА НАЛИЧИЕ ПОЛНЫХ АНТИТЕЛ В РЕАКЦИИ АГГЛЮТИНАЦИИ В СОЛЕВОЙ СРЕДЕ

1. Предварительная обработка стандартных эритроцитов

Кровь для приготовления стандартных эритроцитов берут в количестве 1-2 мл (и более, смотря по потребности) в пробирки вместимостью 8-10 мл, содержащие изотониеский раствор лимонннокислого натрия (из расчета 0,25 мл на 1 мл крови). Пробирки нумеруют и пишут на нихфамилию и инициалы лица, от которого взята кровь.

После взятия крови в пробирки доливают доверху изотонический раствор NaCl, затем содержимое их перемешивают, центрифугируют и отсасывают отмывную жидкость. Такое отмывание повторяют дважды.

Можно брать кровь без стабилизатора. В этом случае после свертывания крови обычно в пробирке остается некоторое количество свободных эритроцитов. Если этих эритроцитов недостаточно, следует интенсивно встряхнуть сверток для отделения большего количества эритроцитов. Полученные таким образом эритроциты отмывают, как сказано выше.

Из отмытых эритроцитов готовят 2% взвесь в других пробирках, взятых по числу образцов стандартных эритроцитов и так же пронумерованных.

Для приготовления 2% взвеси в эти пробирки капают по 2,5 мл (49 капель) изотонического раствора NaCl и в каждую пробирку в соответствии с ее нумерацией переносят одну каплю эритроцитов. Содержимое пробирок перемешивают для получения равномерной 2% взвеси эритроцитов, которая применяется для исследования сыворотки.


2. Техника исследования

а. В штатив устанавливают ряд маленьких пробирок (высотой 2-2,5 см с внутренним диаметром 0,5-0,6 см с гладким дном округлой формы) по числу образцов эритроцитов, с которыми испытывается сыворотка. Предварительно штатив покрывают листом бумаги, в котором накалывают отверстия, сквозь которые устанавливают пробирки. Против каждой пробирки на бумаге пишут порядковый номер, а также фамилию, инициалы, группу крови и резус-принадлежность лица, от которого взята кровь.

Вместо пробирок можно использовать планшеты для иммунологических реакций с лунками, имеющими закругленное дно.

б. Во все пробирки (лунки планшета) вводят по одной капле (0,05 мл) испытуемой сыворотки и по одной капле изотонического раствора NaCl.

Штатив с пробирками (планшет) встряхивают для перемешивания их содержимого.

в. В пробирки (лунки), согласно их нумерации и обозначению вводят по одной капле (0,05 мл) капле 2% взвеси эритроцитов, приготовленных в качестве стандартов.

г. Содержимое снова перемешивают и штатив (планшет) помещают для инкубации в термостат при +37°С на один час и затем оставляют на столе при комнатной температуре на 2-3часа.

д. После инкубации штатив с пробирками (планшет) вынимают и наблюдают результат в виде наличия или отсутствия агглютинации эритроцитов.


3. Трактовка результата

Результат реакции учитывают при помощи лупы с 6-8-кратным увеличением по форме осадка эритроцитов на дне пробирки (лунки) (см. "Инструкцию по определению резус-принадлежности крови методом агглютинации в солевой среде").

Наличие агглютинации с резус-положительными образцами эритроцитов и отсутствие ее с резус-отрицательными и собственными эритроцитами указывает на присутствие в сыоротке полных резус-антител.

Отсутствие агглютинации со всеми образцами эритроцитов указывает на то, что полные резус антитела анти-D, C, E, а также c и e не выявлены.

Определение специфичности см.п.IX.


4. Титрование сыворотки, содержащей полные резус-антитела

а. В штатив устанавливают 10 маленьких пробирок для разведения сывороток 1:2,Ю 1:4, 1:8 и т.д. до 1:1024. Можно использовать планшет для иммунологических реакций.

б. Во все пробирки (лунки) капают по две капли (0,1 мл) изотонического раствора NaCl.

в. В первую пробирку (лунку) (с обозначением 1:2) вводят две капли (0,1 мл) исследуемой сыворотки. После перемешивания из первой пробирки )лунки) переносят две капли во вторую, из второй - в третью и т.д. до последней, из которой две капли удаляют. В результате получаются разведения сыворотки от 1:2 до 1:1024.

г. В каждую пробирку (лунку) добавляют по одной капле (0,05 мл) 2% взвеси стандартных эритроцитов или смеси, приготовленной от 4-5 резус-положительных лиц. Эритроциты для взвеси готовят, как сказано выше.

д. Содержимое пробирок перемешивают и штатив (плншет) помещают в термостат при температуре +37°С на один час.

е. После инкубации штатив (планшет) вынимают из термостата и наблюдают результат.

Последнее разведение, в котором наблюдается агглютинация, принимают за титр выявленных полных резус-антител.

Если агглютинация эритроцитов наблюдается во всех разведениях сыворотки, то, следовательно, титр резус-антител выше 1:1024. В таких случаях следует продолжить разведение сыворотки и далее продолжать исследование, как сказано выше.


^ VIII. ФЕНОМЕН ЗОНЫ

При очень высокой степени иммунизации организма образующиеся резус-антитела иногда дают феномен зоны. Этот феномен заключается в том, что сыворотка крови таких лиц будучи взята неразведенной или в небольшом разведении (1:2), может не дать или дать слабую положительную реакцию при ее испытании с резус-положительными эритроцитами. Однако, если такую сыворотку развести, то при некотором разведении (чаще всего 1:8, 1:16, иногда и более) резус-антитела в ней становятся активными и дают хорошо выраженную положительную реакцию. Реже всего феномензны бывает выражен в методе конглютинации с желатином или при испытании сыворотки непрямой пробы Кумбса. Поэтому, а также ввиду большей ее чувствительности, проба Кумбса является очень ценной реакцией для выявления неполных резус-антител.

Если все методы, включая непрямую пробу Кумбса,не выявляют в сыворотке резус-антител, а в анамнезе у лица, кровь которого испытывается, есть указания на сенсибилизацию к резус-антигену, то для исключения феномена зоны следует испытать эту сыворотку, взятую в разведениях. Для этого сыворотка разводится и испытывается. как указано для каждого метода в разделах "Титрование сыворотки".

Если при наблюдении результата в каких-либо разведениях сыворотки отмечается положительная реакция, следовательно, в испытуемой сыворотке есть антитела. В этих случаях для дальнейшего исследования сыворотки ее следует развести, при этом выбрать то разведение, в котором наблюдалась наиболее выраженная положительная реакция. В качестве разводителя при исследовании применяют изотоничесикй раствор NaCl. Исследование разведенной сыворотки проводится как описано выше для каждого метода. При установлении высоты титра учитывается общее разведение нативной сыворотки, начиная с 1:2.


^ IX. СПЕЦИФИЧНОСТЬ АНТИТЕЛ.

Сыворотки, давшие положительный результат со всеми образцами резус-положительных эритроцитов могут содержать как "чистые" антитела анти-D, так и одновременно антитела к нескольким антигенам: анти-D+C , анти-D+Е или анти-C+D+E.

В некоторых случаях исследуемые сыворотки, срдержащие резус-антитела, могут вызывать агглютинацию избирательно - не всех образцов резус-положительных эритроцитов. Это может быть связано с тем, что в испытуемой сыворотке имеются антитела не анти-D (наиболее часто встречающиеся, а анти-C или анти-Е).

Положительный результат может также наблюдаться и с резус-отрицательными эритроцитами за счет других антигенов системы резус - c, е или антигенов других систем.

Для выяснения специфичности резус-антител необходимо специальное исследование сыворотки с набором стандартных эритроцитов, включающих редкие группы ccDee, Ccddee, ccddEe, а также резус-отрицательные образцы (сcddee), включающие как содержащие, так и не содержащие антигены Келл (K) и Даффи (Fy). С ними же проводится и титрование сыворотки.


^ X. ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ

1. Заключение о наличии в сыворотке резус-антител можно сделать при положительном результате, полученном любым методом исследования.

2. Заключение об отсутствии в сыворотке резус-антител сожно сделать только при отрицательном результате, полученном при исследовании не менее чем двумя методами, одним из которых является любой метод, выявляющий неполные резус-антитела, а другим - реакция агглютинации в солевой среде, выявляющая полные резус-антитела. При этом следует учитывать возможный феномен зоны.


Приложение 12

УТВЕРЖДЕНО

Приказ Минздрава России

от 09.01.1998г. №2


ИНСТРУКЦИЯ

^ ПО ИЗГОТОВЛЕНИЮ РЕДКИХ СЫВОРОТОК, ПРЕДНАЗАНЧЕННЫХ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РАЗЛИЧНЫХ ИЗОАНТИГЕНОВ ЭРИТРОЦИТОВ ЧЕЛОВЕКА


1. Введение


Под редкими группами крови понимаются такие сочетания групповых антигенов в эритроцитах человека, в которых : а) отсутствует какой-либо из антигенов высокой частоты, б) отсутствует одновременно несколько антигенов, в том числе, активных и высокой частоты, в) содержатся радличные антигены, г) имеются редкие сочетания антигено разных систем.

Под редкими сыворотками подразумеваются сыворотки крови людей, чаще с редкой группой крови, содержащие изоиммунные антитела, редко возникающие у людей вследствие естественной сенсидилизации при беременности. Причиной редкости такой сенсибилизации является редкость или наоборот высокая частота антигенов, против которых могут быть направлены антитела, а также низкая иммуногенная активность некоторых антигенов.

К редким сыворотками относятся моноспецифические сыворотки, содержащие антитела к какому-либо одному антиген системы резус- C, E, c, e, Cw, или кодному из антигенов других систем - Келл,Даффи, Кидд, Левис, Лютеран, MNSs и другие.

К редким сывороткам относятся также полиспецифические сыворотки, содержащие два или более вида антител, одними из которых чаще всего бывают антитела анти-D, а другими- антитела редкой специфичности. К таким редким полиспецифическим сывороткам относятся сыворотки анти-C+D, анти-D+E анти-C+D+E, анти-D+анти-Fya, анти-D+Келл и другие сочетания антител анти-D с какими-либо редкими антителами, а так же все сочетания только редких антител, например анти-С+е, анти-С+анти-Fya и т.д.

Трансфузионная терапия, проводимая лицам, принадлежащим к редким группам, повышает возможность образования редких антител, особенно, если кровь переливалась повторно и реципиент имел в прошлом беременности.

Реиммунизация соответствующим антигеном, проводимая лицам, иммунизированным ествественным путем при беременности или вследствие трансфузий крови еще более повышает возможность образования активных редких антител.

Лица, иммунизированные естественным путем при беременности или вследствие гемотрансфузий, могут привлекаться в кадры доноров с дополнительной реиммунизацией соответствующим антигеном.

Привлечение к донорству и реиммунизация для получения редких сывороток проводятся так же, как это предусмотрено для сывороток антирезус ("Инструкцией по иммунизации доноров для получения сывороток и иммуноглобулина антирезус").

Реиммунизация допустима для повышения активности любых антител,так как не вносит ничего качественно нового в иммунологический статус иммунизируемого лица и, следовательно, не создает дополнительной опасности в случае необходимости переливания крови.

Эффективной мерой получения некоторых редких сывороток является искусственная иммунизация доноров-добровольцев.

Искусственная иммунизация ранее несенсибилизированных лиц допустима только теми антигенами и при тех условиях, когда это не может повлечь каких-либо осложнений для иммунизируемого лица в смысле возможности неблагополучных исходов последующих беременностей или несовместимости в случае переливания крови.

Исходя из сказанного, а также из того, что потребность в редких сыворотках разной специфичности различна, для получения таких сывороток рекомендуется дифференцированный подход и разные способы.

^ 2. Основное назначение редких сывороток в учреждениях Службы крови

Моноспецифические сыворотки антирезус - анти-С, анти-Е, анти-с, анти-е, анти-Сц, а также моноспецифические сыворотки других систем применяются наряду с сыворотками анти-D при фенотипировании крови джоноров для создания панели стандартныхэритроцтов и кадров типированных доноров, в том числе доноров редких групп, а также для установления фенотипа крови больных и других лиц с целью выянения причини предупреждения сенсибилизации и трансфузионных осложнений.

Полиспецифические сыворотки анти-C+D, анти-D+E, анти-C+D+E применяются при обследовании доноров и при обработке их крови на втором этапе исследования на резус-принадлежность. При этом сыворотки анти-C+D и анти-D+E должны быть использованы одновременно или могут быть заменены одной сывороткой анти-C+D+E (см."Инструкцию по определению резус-принадлежности").

Сыворотки, содержащие антитела анти-D и дополнительно антитела других систем, например анти-Fya или анти-Келл, являющиеся главным образом случайными находками, могут быть использованы при исследовании крови резус-отрицательных лиц для определения у них антигенов против которых направлены дополнительные антитела.


^ 3. Источники и способы получения сыворотки

Для получения моноспецифических сывороток анти-C и анти-E необходимо выявление лиц, сенсибилизированных естественным путем, и привлечение их к донорству с последующей реиммунизацией.

Допускается искусственная иммунизация этими антигенами доноров-добровольцев, которая требует длительных курсов, так как не всегда бывает успешной,особенно для получения активных сывороток анти-C.

^ Моноспецифические сыворотки анти-с и анти-е следует получать только от лиц, сенсибилизированных естественным путем. Рекомендуется привлекать таких лиц к донорству с последующей реиммунизацией. Искусственная иммунизация антигеном с и антигеном е недопустима, так как в этих случаях нужно было бы иммунизировать резус-положительных лиц, то есть сделать их реципиентами, для которых будет несовместимой вся резус-отрицательная и в большинстве случаев резус-положительная кровь.

^ Моноспецифические сыворотки анти-Келл, анти-Даффи, анти-Кидд, анти-S, анти-s, анти-Cw следует получать от лиц, сенсибилизированных естественным путем. Поскольку такие антитела возникают исключительно редко, чаще всего при беременности в сочетании с многократными трансфузиями крови, то выявление таких сенсибилизированных лиц, то есть первичный поиск редких антител следует организовывать с привлечением к этой работе отделений переливания крови при больницах.

После выздоровления этих лиц желательно привлекать к донорству с последующей реиммунизацией.

Искусственная иммунизация антигенами Келл, Даффи, Кидд, S, e, Cw разрешается только для ограниченного числа доноров в институтах переливания крови, а также в Центре изосерологических стандартов при Нижегородской областной станции переливания крови и Станции переливания крови Комитета здравоохранения г.Москвы.

^ Моноспецифические сыворотки анти-M, анти-N, анти-P, анти-Левис могут быть выявлены при массовых обследованиях крови доноров, поскольку такие антитела иногда (очень редко) бывают у людей врожденными. Также рекдо встречаются такие антитела у лиц, сенсибилизированных естественным путем - беременностями и трансфузиями крови. Таких лиц следует привлекать к донорству с последующей реиммунизацией. Искусственная иммунизация этими антигенами противопоказана.

Систематическое получение сывороток анти-M, анти-N, анти-P и анти-Левис производятся путем иммунизации животных в учреждениях судебной медицины.

^ Сыворотки двойной специфичности анти-C+D следует получать от лиц, сенсибилизированных естественным путем с последующим привлечением их к донорству и реиммунизации.

^ Сыворотки двойной и тройной специфичности - анти-D+E и анти-C+D+Е могут быть получены почти исключительно путем искусственной иммунизации доноров-добровольцев, так как такое сочетание антител очень редко возникает при естественной сенсибилизации.

^ Антитела специфичности анти-С+D, анти-D+E и анти-C+D+E иногда образуются при искусственной иммунизации доноров-добровольцев антигеном D. В этих случаях допустимо продолжение иммунизации с использованием тех антигенов против которых требуется повысить титр антител.

^ Сыворотки анти-D в сочетании с антителами какой-либо другой специфичности согут быть получены от лиц, сенсибилизированных естественным путем при беременности и трансфузиях крови и при этом на протяжение небольшого срока, так как редкие антитела у таких сенсибилизированных лиц быстро ослабевают или исчезают из крови. Искусственная иммунизация для получения таких сывороток противопоказана.

1   2   3   4   5   6   7   8   9   10

Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:

Похожие:

Приказ Минздрава России от 09. 01. 1998г. №2 инструкция по предупреждению несовместимости при переливании крови I. Введение > 1 icon Приказ 23 мая 1985 г. N 700 о мерах по дальнейшему предупреждению осложнений при переливании крови,

Приказ Минздрава России от 09. 01. 1998г. №2 инструкция по предупреждению несовместимости при переливании крови I. Введение > 1 icon Методика определения группы крови. Проведение проб на совместимость при переливании крови. Показания

Приказ Минздрава России от 09. 01. 1998г. №2 инструкция по предупреждению несовместимости при переливании крови I. Введение > 1 icon Концепция разработана по заказу Минобразования России при консультативной поддержке Минздрава России

Приказ Минздрава России от 09. 01. 1998г. №2 инструкция по предупреждению несовместимости при переливании крови I. Введение > 1 icon Приказ Минздрава России от 20. 12. 01 №460 инструкция по констатации смерти человека на основании

Приказ Минздрава России от 09. 01. 1998г. №2 инструкция по предупреждению несовместимости при переливании крови I. Введение > 1 icon Приказ от 24 ноября 1998 г. N 338 о внесении изменений и дополнений в приказ минздрава россии от

Приказ Минздрава России от 09. 01. 1998г. №2 инструкция по предупреждению несовместимости при переливании крови I. Введение > 1 icon Согласно Приложению к Приказу Минздравсоцразвития России от 30 октября 2007 г. N 673 о внесении изменений

Приказ Минздрава России от 09. 01. 1998г. №2 инструкция по предупреждению несовместимости при переливании крови I. Введение > 1 icon Приказ >> от 18 октября 2002 года n 316 >> Об утверждении перечня нормативных правовых актов Минздрава

Приказ Минздрава России от 09. 01. 1998г. №2 инструкция по предупреждению несовместимости при переливании крови I. Введение > 1 icon Приказ Минздрава РФ от 30 июля 2001 г. N 291 "О мерах по предупреждению распространения инфекций,

Приказ Минздрава России от 09. 01. 1998г. №2 инструкция по предупреждению несовместимости при переливании крови I. Введение > 1 icon Приказ Минздрава России от 12 ноября 2012г. №572н

Приказ Минздрава России от 09. 01. 1998г. №2 инструкция по предупреждению несовместимости при переливании крови I. Введение > 1 icon Выдержки из Приказа Минздрава РФ от 25 ноября 2002 г. №363 "Об утверждении Инструкции по применению

Разместите кнопку на своём сайте:
Медицина


База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
Документы