Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям для специальности 060101 Лечебное дело (очная форма обучения) Красноярск 2013 icon

Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям для специальности 060101 Лечебное дело (очная форма обучения) Красноярск 2013





Скачать 2.5 Mb.
Название Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям для специальности 060101 Лечебное дело (очная форма обучения) Красноярск 2013
страница 9/11
Дата 03.04.2013
Размер 2.5 Mb.
Тип Документы
1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11
Тема: «Работа в морфологической лаборатории. Отработка навыков по изготовлению гистологических препаратов, овладение основными методами окраски гистологических препаратов (гематоксилин-эозин)».


^ 2. Форма организации учебного процесса: практическое занятие.


3. Значение темы. С помощью применяемого в гистологии комплекса методических приемов и современного оборудования в морфологической лаборатории можно овладеть самым распространенным методом окраски гемотоксилин-эозин, позволяющим изучить микро- и ультраструктуры, гистофизиологию, приспособительные реакции, восстановительные свойства клеток, тканей и органов в норме, эксперименте и патологии. Изучение биопсийного материала может иметь существенное значение в диагностике заболеваний, выборе метода лечения.

^ 4. Цели обучения:

общая
(обучающийся должен обладать ОК и ПК):

- способностью и готовностью анализировать социально-значимые проблемы и процессы, использовать на практике методы гуманитарных, естественнонаучных, медико-биологических и клинических наук в различных видах профессиональной и социальной деятельности (ОК-1);

- способностью и готовностью к логическому и аргументированному анализу, к публичной речи, ведению дискуссии и полемики (ОК-5);

- способностью и готовностью выявлять естественнонаучную сущность проблем, возникающих в ходе профессиональной деятельности, использовать для их решения соответствующий физико-химический и математический аппарат (ПК-2);

- способностью и готовностью к формированию системного подхода к анализу медицинской информации, опираясь на всеобъемлющие принципы доказательной медицины, основанной на поиске решений с использованием теоретических знаний и практических умений в целях совершенствования профессиональной деятельности (ПК-3);

- способностью и готовностью анализировать закономерности функционирования отдельных органов и систем, использовать знания анатомо-физиологических основ, основные методики клинико-иммунологического обследования и оценки функционального состояния организма взрослого человека, для своевременной диагностики заболевания и патологических процессов (ПК-16);

- способностью и готовностью изучать научно-медицинскую информацию, отечественный и зарубежный опыт по тематике исследования (ПК-31);

- способностью и готовностью к участию в освоении современных теоретических и экспериментальных методов исследования с целью создания новых перспективных средств, в организации работ по практическому использованию и внедрению результатов исследований (ПК-32).

учебная:

знать основные методы гистологического исследования неживых и живых объектов, а также основные этапы изготовления препаратов для световой и электронной микроскопии, правила техники безопасности и работы в морфологической лаборатории с реактивами, приборами, животными; уметь работать с микроскопом, используя различные источники освещения, объективы и окуляры на основании «Правил пользования микроскопом»;

владеть медико-аналитическим понятийным аппаратом, навыками микрокопирования и окраски гистологических препаратов.


5. План изучения темы:

5.1. Контроль исходного уровня знаний(тестирование).

Выбрать один правильный ответ.


^ 1. УКАЖИТЕ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ЭТАПОВ:

  1. фиксация, уплотнение, приготовление среза

  2. приготовление среза, фиксация, окраска, уплотнение

  3. окраска, приготовление среза, заливка, обезвоживание

  4. фиксация, промывка, обезвоживание, уплотнение, заливка, приготовление среза, окраска, заключение


^ 2. ПРОЦЕСС ДЕПАРАФИНИРОВАНИЯ ПРОВОДЯТ В:

  1. ксилоле

  2. спирте

  3. формалине

  4. воде

3. ОКРАШИВАНИЕ СРЕЗОВ, ИСПОЛЬЗУЕМЫХ ДЛЯ ЭЛЕКТРОННОЙ МИКРОСКОПИИ, ПРОВОДЯТ:

  1. гематоксилином

  2. эозином

  3. суданом

  4. солями тяжелых металлов


^ 4. СРЕЗЫ ПЕРЕД ОКРАШИВАНИЕМ ПОМЕЩАЮТСЯ:

1) в спирты повышающей концентрации

2) в спирты с понижающей концентрацией

3) в ферменты

4) в толуол, бензол или в ксилол


^ 5. ПО ХИМИЧЕСКОЙ ПРИРОДЕ ОСНОВНЫЕ КРАСИТЕЛИ ЭТО:

  1. основные соли

  2. кислые соли

  3. кислоты

  4. ферменты

6. ПО ХИМИЧЕСКОЙ ПРИРОДЕ КИСЛЫЕ КРАСИТЕЛИ ЭТО:

  1. основные соли

  2. кислые соли и кислоты

  3. кислоты

  4. ферменты

7. Просветление срезов проводится в:

  1. спирте 70%

  2. в карболе

  3. в смеси карбол-ксилоле

  4. в дистиллированной воде

^ 8. ПОСЛЕ ДЕПАРАФИНИРОВАНИЯ СРЕЗЫ ПЕРЕНОСЯТСЯ:

  1. в спирты с понижающей концентрацией

  2. в спирты с повышающей концентрацией

  3. в дистиллированную воду

  4. в ксилол

^ 9. ВРЕМЯ ОКРАШИВАНИЯ ГЕМАТОКСИЛИНОМ:

  1. 10 минут

  2. 3 минуты

  3. 15 минут

  4. 1-2 минуты

10. ДЛЯ ЗАКЛЮЧЕНИЯ СРЕЗОВ ИСПОЛЬЗУЮТ:

  1. воск

  2. канадский бальзам

  3. специальный клей

  4. абсолютный спирт

^ 5.2. Основные понятия и положения темы:

Для разных способов микрокопирования требуется и специальные методы приготовления препаратов.

Мы разберем один из методов микроскопической техники - это подготовка срезов к окрашиванию и окраска самыми распространенными красителями (гематоксилин – эозин).

^ 1. Подготовка срезов к окраске. Окраска препаратов. Разберём простейший метод окрашивания: гематоксилин + эозин. Так как большинство красителей - это водорастворимые растворы, то перед окраской срезы депарафинируются, то есть освобождаются от пропитывающего их парафина или целлоидина. Удаление парафина из среза осуществляется путем помещения его в стаканчик с толуолом, бензолом или ксилолом на 3-4 минуты. Далее срезы переносятся последовательно в стаканы со спиртами понижающейся концентрации (100°, 96°, 70°) и, наконец, в дистиллированную воду. Окрашиваются гематоксилином (приблизительно 5 мин), ополаскиваются в дистиллированной воде, окрашиваются эозином. Обезвоживаются в спиртах 70 °, 96 °, 100 °. Затем просветляются в карбол-ксилоле до исчезновения мути, а затем в чистом ксилоле.

^ 2. Заключение срезов. На срез наносится капля смолы (канадского бальзама), имеющий показатель преломления одинаковый со стеклом. Срез сверху покрывается покровным стеклом.

^ Правила проведения пресс-конференции. Студенты делятся на ведущего, участников, журналистов телевидения и печатной прессы, оппонентов:

Студенты участники конференции (до 5 человек) получают тему доклада до проведения пресс-конференции и тщательно готовят доклад (на 5 минут):

  1. «Современные методы окрашивания гистологических препаратов в морфологической лаборатории».

Цель проведения данной конференции рассказать о конкретных методах окрашивания, применяемых в морфологической лаборатории, что ещё неосвещено в прессе, имеющее большое значение в диагностическом смысле.

На пресс-конференции выступают 1-5 участников. Как правило, это один, главный, ньюсмейкер, и участники, которые являются экспертами по тем или иным вопросам, касающимся повода пресс-конференции. Нужно заранее согласовать между участниками свои роли, очередность и темы выступлений, кто на какие вопросы будет отвечать. Сообщить об этом модератору (ведущему). Обсудить и отработать действия в случае возникновения проблем (например, появление оппонента, опровергающего ваше заявление и задающего провокационные вопросы).

Модератор (ведущий) ведет пресс-конференцию. Пресс-конференцию начинают с приветствия присутствующих журналистов.

^ 5.3 . Самостоятельная работа по теме:

Обучающий должен ознакомиться с текстом учебных пособий, лекций и продемонстрировать следующие умения:

№ п\п

Название практических умений

1. Батарея для окрашивания срезов гематоксилин-эозином.

2. Блоки с материалом для изготовления срезов.

1. Окрашивание срезов.

2. Заключение срезов.

3. Микроскопирование изготовленного препарата.


^ 5.4. Итоговый контроль знаний по теме занятия:

- ответы на вопросы по теме занятия:

  1. Назовите основные этапы изготовления гистологического препарата.

  2. Что такое «фиксация» и в чем ее сущность?

  3. Какие наиболее употребляемые в гистологической практике простые и сложные химические фиксаторы Вы знаете?

  4. Какие плотные среды используются для объектов с целью последующего изготовления гистологических препаратов?

  5. Укажите последовательность заливки в парафин.

  6. Назовите приборы для изготовления срезов. Их типы, преимущества и недостатки.

  7. Какие гистологические структуры называются оксифильными, базофильными и нейтрофильными?

  8. Общая характеристика и классификация гистологических красителей.

  9. В чём заключается основной принцип окраски?

  10. Алгоритм окраски гематоксилин-эозин (Г+Э).

  11. В чем значение гистохимии?

- решение ситуационных задач:

Задача № 1.

Врач должен срочно получить ответ о состоянии органа после его резекции или удаления.

  1. Каким методом можно быстро приготовить гистологический срез?

  2. Какие этапы при изготовлении гистологического препарата данным методом не применяют.

Задача № 2.

На препарате (окраска гематоксилин-эозином) видны клетки, цитоплазма которых: а) базофильна; б) оксифильна.

  1. Какие вещества, присутствующие в цитоплазме, обуславливают эти свойства?

  2. Назовите структуры клетки окрашивающиеся оксифильно и базофильно.


^ 6. Домашнее задание для уяснения темы занятия (ответить на контрольные вопросы и тестовые задания, решить ситуационные задачи по теме «Световая микроскопия. Новые направления и новое оборудование», см. методические указания для обучающихся № 14 к внеаудиторной работе).


^ 7. Рекомендации по выполнению НИРС, в том числе список тем, предлагаемых кафедрой.

Подготовить рефераты на тему:

  1. Разновидности гематоксилина, его применение в лаборатории.

  2. Современное оборудование для окрашивания срезов.


^ 1. Занятие № 14

Тема «Световая микроскопия. Новые направления и новое оборудование».


2. Форма организации занятия:
практическое занятие.


^ 3. Значение изучения темы. Объектами изучения дисциплины «Новые клеточные технологии» являются организмы на клеточном и субклеточном уровнях их организации. Такой уровень исследования возможен только при использовании микроскопов. Однако изучаемая дисциплина предполагает исследования, связанные с использованием стволовых клеток, что в свою очередь предполагает использование новых, наиболее современных методов микроскопии. Именно современные виды световой микроскопии позволят понять сущность многих процессов, происходящих в организме, в норме, при патологии и использовании для лечения стволовых клеток.


^ 4. Цели обучения:

- общая
(обучающийся должен обладать ОК и ПК):

- способностью и готовностью анализировать социально-значимые проблемы и процессы, использовать на практике методы гуманитарных, естественнонаучных, медико-биологических и клинических наук в различных видах профессиональной и социальной деятельности (ОК-1);

- способностью и готовностью к логическому и аргументированному анализу, к публичной речи, ведению дискуссии и полемики (ОК-5);

- способность и готовность выявлять естественнонаучную сущность проблем, возникающих в ходе профессиональной деятельности врача-педиатра, использовать для их решения соответствующий физико-химический и математический аппарат (ПК-2);

- способность и готовность к формированию системного подхода к анализу медицинской информации, опираясь на всеобъемлющие принципы доказательной медицины, основанной на поиске решений с использованием теоретических знаний и практических умений в целях совершенствования профессиональной деятельности (ПК-3);

- способность и готовность анализировать закономерности функционирования отдельных органов и систем, использовать знания анатомо-физиологических основ, основные методики клинико-иммунологического обследования и оценки функционального состояния организма детей и подростков для своевременной диагностики заболеваний и патологических процессов (ПК-16);

- способностью и готовностью изучать научно-медицинскую информацию, отечественный и зарубежный опыт по тематике исследования (ПК-31);

- способностью и готовностью к участию в освоении современных теоретических и экспериментальных методов исследования с целью создания новых перспективных средств в педиатрии, в организации работ по практическому использованию и внедрению результатов исследований (ПК-32);

- учебная:

знать знать сущность и назначение световой микроскопии, устройство микроскопа и их виды;

уметь работать с микроскопом, осуществлять микроскопию гистологических препаратов на малом и большом увеличениях;

владеть медико-аналитическим понятийным аппаратом.


5. План изучения темы:

5.1. Контроль исходного уровня знаний (тестирование).

Выбрать один правильный ответ

  1. ^ СВЕТОВАЯ МИКРОСКОПИЯ ПРЕДНАЗНАЧЕНА

1) для изучения микрообъектов в проходящем или отраженном свете

2) для изучения клеток в пространстве и времени

3) для фотографирования микрообъектов

4) для облучения клеток


^ 2. ДЛЯ СВЕТОВОЙ МИКРОСКОПИИ ИСПОЛЬЗУЮТ

1) микротомы

2) микроскопы

3) термостаты

4) криостаты


3. ОСНОВНЫМИ ХАРАКТЕРИСТИКАМИ МИКРОСКОПОВ ЯВЛЯЮТСЯ

1) яркость изображения

2) разрешающая способность и контрастность изображения

3) увеличительная способность

4) фоторазрешающая способность


^ 4. ОСНОВНЫЕ ЭЛЕМЕНТЫ МИКРОСКОПА

1) предметный столик, тубус, диафрагма

2) револьвер, тубус, окуляр

3) объектив, окуляр, предметный столик, осветительная и фокусирующая системы

4) тубус, зеркало, объектив


^ 5. ВИДЫ МИКРОСКОПОВ ПО УРОВНЮ СЛОЖНОСТИ УСТРОЙСТВА

1) учебные и рабочие

2) исследовательские

3) лабораторные

4) учебные, рабочие, лабораторные, исследовательские


^ 6. В ЗАВИСИМОСТИ ОТ НАПРАВЛЕНИЯ СВЕТОВОГО ПОТОКА РАЗЛИЧАЮТ

1) высокие и низкие микроскопы

2) прямые и инвертированные

3) прямые и обратные

4) прямые и боковые


^ 7. ТИПЫ СВЕТОВОЙ МИКРОСКОПИИ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ИСТОЧНИКА СВЕТА

1) обычная и конфокальная

2) обычная и лазерная

3) обычная, фазово-контрастная, флюоресцентная, темнопольная ультрафиолетовая, поляризационная

4) обычная, световая


^ 8. ИСТОЧНИКОМ ОСВЕЩЕНИЯ ПРИ ОБЫЧНОЙ МИКОРОСКОПИИ ЯВЛЯЕТСЯ

1) световой поток

2) ультрафиолетовый луч

3) лазерный луч

4) солнечный луч


^ 9. СУЩНОСТЬ ФЛЮОРЕСЦЕНТНОЙ МИКРОСКОПИИ СОСТОИТ

1) в движении изучаемого объекта

2) в свечении изучаемых объектов после их обработки люминофорами

3) в фотографировании изучаемого объекта

4) в измерении изучаемых объектов


^ 10. ИСТОЧНИК СВЕТА, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ПРИ КОНФОКАЛЬНОЙ МИКРОСКОПИИ

1) ультрафиолетовый луч

2) рентгеновские лучи

3) обычный свет

4) лазерный луч, идущий из конфокальной плоскости микроскопа

^ 5.2. Основные понятия и положения темы.

Развитие медицины в современной России сопровождается закономерным возникновением проблем перед врачом. Это лавинообразное возрастание фиксируемой медицинской информации, разработка и внедрение наукоёмких медицинских технологий, постоянно растущие требования пациентов к качеству медицинской помощи.

В связи с этим, растущая потребность в критической оценке медицинской информации с целью установления её надёжности и достоверности привела как организаторов здравоохранения, так и врачей к необходимости выработки концепции доказательной медицины. Доказательная медицина (англ. Evidence-based medicine — медицина, основанная на доказательствах) — подход к медицинской практике, при котором решения о применении профилактических, диагностических и лечебных мероприятий принимаются исходя из имеющихся доказательств их эффективности и безопасности, а такие доказательства подвергаются поиску, сравнению, обобщению и широкому распространению для использования в интересах больных (Evidence Based Medicine Working Group, 1993).

Неотъемлемой частью доказательной медицины и современной научной деятельности является фиксация информации о состоянии биологических объектов при воздействии на них тех или иных факторов. В качестве биологического объекта выступают как экспериментальные животные, на которых апробируют модели различных патологий и способов их лечения, так и пациенты, для подтверждения – действительно ли эффективен применяемый способ профилактики или лечения.

Одним из способов изучения биологических объектов является морфологическое исследование с помощью световой микроскопии.

Световая микроскопия – это изучение микрообъектов в проходящем или отраженном свете. Морфологическое исследование осуществляют с помощью специальных оптических приборов – микроскопов.

Основными характеристиками микроскопа являются разрешающая способность и контраст. ^ Разрешающая способность – это минимальное расстояние, на котором находятся две точки, демонстрируемые микроскопом раздельно. Например, разрешение человеческого глаза в режиме наилучшего видения равно 0,173 мм. В световом микроскопе возможно различить две точки на расстоянии 0,2 мкм. Разрешение определяется длиной световой волны.

^ Контраст изображения – это различие яркостей изображения и фона. Если это различие составляет менее 3-4 %, то его невозможно уловить глазом. Тогда изображение останется невидимым, даже если микроскоп разрешает его детали. На контраст влияют как свойства объекта, которые изменяют световой поток по сравнению с фоном, так и способности оптики уловить возникающие различия в свойствах луча.

Возможности светового микроскопа ограничены волновой природой света. Физические свойства света – цвет (длина волны), яркость (амплитуда волны), фаза, плотность и направление распространения волны изменяются в зависимости от свойств объекта. Для повышения контрастности используют окрашивание объектов.

Ключевыми элементами микроскопов являются объектив и окуляр, закрепленные в тубусе на подставке.

^ Объектив микроскопа – представляет собой сложную оптическую систему, образующую увеличенное изображение объекта, и является основной и наиболее ответственной частью микроскопа. Микрообъектив создает действительное перевернутое изображение, которое рассматривается через окуляр. В простых микроскопах, как правило, используют два объектива – с увеличением на 10 и на 40. В более сложных микроскопах количество объективов больше, они закрепляются в виде так называемого револьвера. Как правило, это увеличения в 4, 10, 20, 40 и 100 раз. Объектив с кратностью увеличения в 100 раз используют при масляной иммерсии.

Окуляр – обращённая к глазу часть микроскопа, предназначаемая для рассматривания с некоторым увеличением оптического изображения, даваемого объективом микроскопа. Насадка, в которой крепится окуляр, может быть монокулярная (в простых микроскопах) – один окуляр, можно смотреть только одним глазом; бинокулярная – два окуляра, возможно смотреть обоими глазами; тринокулярная – имеются два окуляра для осмотра объекта исследования двумя глазами, а также дополнительный третий выход для крепления фото-видеодокументирующей системы.

Следует отметить, что в обычных микроскопах изображение получается плоскостное, несмотря на то, что в окуляры можно смотреть двумя глазами. Но существуют, так называемые стереомикроскопы, которые обеспечивают подлинно объёмное восприятие, изображения предмета образуют стереопару, что обеспечивает передачу объектов в соответствии с тем, как их раздельно видит правый и левый глаз человека. Такие микроскопы предназначены для исследования непрозрачных объектов с различной степенью отражающей способности и полупрозрачных объектов.

Кроме этого, в микроскопе имеются следующие компоненты – предметный столик, осветительная система и фокусирующая система.

^ Предметный столик служит для крепления изучаемого объекта. Для удобства предметные столики оснащают специальными приспособлениями – препаратоводителями, что позволяет более точно перемещать предметное стекло.

^ Осветительная система состоит из источника света и дополнительных приспособлений, регулирующих световой поток. В самых простых микроскопах вместо источника света используют зеркало, которое направляет световой поток от внешних источников света. В современных микроскопах в качестве источника света используется галогенновая, светодиодная лампа или лампа накаливания. Дополнительное приспособление – это конденсор, который фокусирует рассеянный световой поток в более узкий и яркий. Также еще есть ирисовая диафрагма, для регуляции интенсивности светового потока.

^ Фокусирующая система представлена макро- и микровинтами для соответственно грубой и тонкой фокусировки и настройки резкости изображения. Эти винты могут располагаться коаксильно или раздельно.

Перед морфологом, изучающим различные объекты в микроскоп, стоят различные по уровню сложности и объемам исследования задачи.

Таким образом, по уровню сложности устройства бывают следующие типы микроскопов:

^ Учебные и рабочие микроскопы – предназначены для выполнения основных операций и, как правило, оснащены минимально достаточным для работы набором объективов и аксессуаров.

^ Лабораторные микроскопы – ориентированы на проведение наблюдений по стандартным методикам. В их комплектацию включены дополнительные объективы и приспособления, например мощные настраиваемые осветители, препаратоводители, измерительные устройства.

^ Исследовательские микроскопы – наиболее сложная и функционально наполненная модель. Сочетает в себе сбалансированные конструкторские и технологические решения по достижению наивысшего оптического качества изображения на микроскопе, использованию всех известных методик микроскопических анализов. Имеется конструктивная возможность применения специализированных устройств для реализации всех известных методов контрастирования, позволяет использовать широкую гамму микрообъективов, окуляров, светофильтров и др. Отличается тщательной сбалансированностью всех основных функциональных частей, таких как осветительные системы, система фокусирования (фокусировочный механизм), револьверное устройство, штатив, проекционная система, визуальная насадка (как правило, тринокулярная).

Исследовательская модель микроскопа идеально подходит для использования в качестве основы для микроскопного комплекса, когда микроскоп оснащается системами визуализации, системами отображения и регистрации информации, специализированным программным обеспечением.

Также еще различают прямые и инвертированные микроскопы.

В прямых микроскопах пучок свет идет снизу вверх, проходит через исследуемый объект и попадает в объектив, расположенный над объектом. Таких микроскопов большинство и в них можно наблюдать объекты, расположенные на предметных стеклах.

В инвертированных микроскопах свет идет сверху вниз, проходит через исследуемый объект и попадает в объектив, расположенный снизу под объектом. Такие микроскопы подходят для изучения как фиксированных объектов на предметных стеклах, так и живых объектов в жидких средах.

Различают следующие типы световой микроскопии:

обычную световую микроскопию, где источником освещения служит естественный или искусственный свет, и разрешение составляет 0,2мкм;

ультрафиолетовую микроскопию, где источником освещения являются ультрафиолетовые лучи, и разрешение составляет 0,1мкм;

флюоресцентную (люминесцентную) микроскопию, где регистрируется спонтанная или индуцированная флюоресценция исследуемых структур или флюорохромов, связанных с этими структурами;

фазово-контрастную микроскопию, при которой за счет специальной кольцевой диафрагмы происходит выявление фазовых изменений прошедшего через неокрашенный препарат света за счет изменения его амплитуды, т.е. яркости получаемого изображения;

темнопольную микроскопию, при которой свет подается на объект изучения сбоку, за счет чего поле выглядит темным, а мелкие частицы в препарате отражают свет, который далее попадает в объектив;

интерференционную микроскопию, которая является разновидностью фазово-контрастной микроскопии и позволяет различать у исследуемого объекта участки различной толщины и плотности;

поляризационную микроскопию, где через объект проходит поляризованный свет и в случае наличия структур, изменяющих ось вращения света, этот свет проходит через поляризатор, не пропускающий основной поток неизмененного поляризованного света;

конфокальную микроскопию, разновидность люминесцентной микроскопии, где регистрируется световой поток, идущий исключительно из фокальной плоскости объектива, а в качестве источника света применяются лазеры. Полученное изображение обрабатывается компьютером и получается четкая трехмерная картинка, позволяющая в подробностях рассмотреть мельчайшие детали клеток.

Для сохранения и дальнейшей обработки данных о строении исследуемых объектов используют системы фото-видеодокументации. Они представляют собой цифровые камеры, подключаемые к компьютеру и сопровождаемые пакетом прикладных программ от производителя для получения и анализа изображения.

^ 5.3. Самостоятельная работа по теме:

Обучающий должен ознакомиться с текстом учебных пособий, лекций и продемонстрировать следующие умения:


№ п/п

Название практических умений

1

Классифицировать микроскопы по сложности их устройства.

2

Классифицировать микроскопы по типу источника света.

3

Знать и показать основные элементы микроскопа.

4

Настроить микроскоп для микроскопии препаратов на малом и большом увеличениях.


^ 5.4. Итоговый контроль знаний:

- ответы на вопросы по теме занятия:

  1. Осветить назначение и сущность световой микроскопии.

  2. Рассказать и продемонстрировать основные элементы в устройстве микроскопа.

  3. Кем и когда были изобретены первые микроскопы?

  4. Представить классификацию микроскопов по их назначению в зависимости от сложности их устройства.

  5. Представить виды световой микроскопии в зависимости от источника света.

  6. Назвать наиболее современные виды микроскопии.

  7. Раскрыть сущность и назначение фазово-контрастной микроскопии.

  8. Раскрыть сущность и назначение темнопольной микроскопии

  9. Раскрыть сущность и назначение флюоресцентной микроскопии.

  10. Раскрыть сущность и назначение конфокальной микроскопии.

  11. Назвать основные характеристики микроскопов.


- решение ситуационных задач:

Задача №1.

На практических занятиях по гистологии, эмбриологии, цитологии для микроскопирования учебных гистологических препаратов студенты используют микроскопы.

1. Какие микроскопы целесообразнее использовать для учебного процесса?

2. Какой источник света могут иметь данные микроскопы?

3. Какие различают микроскопы в зависимости от количества окуляров?


Задача №2.

В исследовательской работе для изучения живых культур и свежезамороженных срезов использован микроскоп.

1.Какой микроскоп целесообразнее использовать для данной цели?

  1. Какой источник света в нем используется?

3. Почему он назван конфокальным?

^ 6. Домашнее задание для уяснения темы занятия (ответить на контрольные вопросы и тестовые задания, решить ситуационные задачи по теме «Новые методы морфометрии в морфологических исследованиях (пресс-конференция в интерактивной форме)» см. методические указания для обучающихся № 15 к внеаудиторной работе).


^ 7. Рекомендации по выполнению НИРС, в том числе список тем, предлагаемых кафедрой.

Подготовить рефераты на темы:

1. Современные виды световой микроскопии.

2. Конфокальные микроскопы, их устройство и назначение.

3. Флюоресцентная микроскопия, ее сущность, виды, назначение.


^ 1. Занятие № 15

Тема «Новые методы морфометрии в морфологических исследованиях».


2. Форма организации занятия:
практическое.


3. Значение изучения темы. Морфометрия – наука, занимающаяся математическим анализом групповых свойств объективно учтенных структур и их связей в организме экспериментальных животных и человека. Объективизация получаемых данных позволяет внедрять принципы доказательной медицины в повседневную деятельность врача и исследователя-морфолога. Такой подход ведет к персонализации методов лечения и профилактики различных заболеваний у современного человека.


^ 4. Цели обучения:

- общая
(обучающийся должен обладать ОК и ПК):

- способностью и готовностью анализировать социально-значимые проблемы и процессы, использовать на практике методы гуманитарных, естественнонаучных, медико-биологических и клинических наук в различных видах профессиональной и социальной деятельности (ОК-1);

- способностью и готовностью к логическому и аргументированному анализу, к публичной речи, ведению дискуссии и полемики (ОК-5);

- способностью и готовностью выявлять естественнонаучную сущность проблем, возникающих в ходе профессиональной деятельности врача-педиатра, использовать для их решения соответствующий физико-химический и математический аппарат (ПК-2);

- способностью и готовностью к формированию системного подхода к анализу медицинской информации, опираясь на всеобъемлющие принципы доказательной медицины, основанной на поиске решений с использованием теоретических знаний и практических умений в целях совершенствования профессиональной деятельности (ПК-3);

- способностью и готовностью анализировать закономерности функционирования отдельных органов и систем, использовать знания анатомо-физиологических основ, основные методики клинико-иммунологического обследования и оценки функционального состояния организма детей и подростков для своевременной диагностики заболеваний и патологических процессов (ПК-16);

- способностью и готовностью изучать научно-медицинскую информацию, отечественный и зарубежный опыт по тематике исследования (ПК-31);

- способностью и готовностью к участию в освоении современных теоретических и экспериментальных методов исследования с целью создания новых перспективных средств в педиатрии, в организации работ по практическому использованию и внедрению результатов исследований (ПК-32);

- учебная:

знать понятие и виды морфометрии;

уметь отбирать образцы органов и тканей для проведения морфометрических исследований;

владеть медико-аналитическим понятийным аппаратом, навыками проведения гисто- и кариоцитометрии.


5. План изучения темы:

5.1. Контроль исходного уровня знаний (тестирование).

Выбрать один правильный ответ


^ 1.БИОМЕТРИЯ ПРЕДНАЗНАЧЕНА

1) для изучения микрообъектов в проходящем или отраженном свете

2) для изучения клеток в пространстве и времени

3) для фотографирования микрообъектов

4) для математического анализа объективно учтенных групповых свойств биологических объектов


^ 2. БИОМЕТРИЯ СОСТОИТ ИЗ СЛЕДУЮЩИХ РАЗДЕЛОВ

1) цитология и эмбриология

2) физиометрия и морфометрия

3) морфометрия и морфология

4) гистология и цитология


^ 3. ОСНОВНОЕ ПРЕДНАЗНАЧЕНИЕ МОРФОМЕТРИИ

1) фотографирование объектов

2) увеличение контрастности изображения

3) изменение разрешающей способности микроскопа

4) математический анализ групповых свойств объективно учтенных структур и их связей в организме экспериментальных животных и человека.


^ 4. ГИСТОМЕТРИЯ – РАЗДЕЛ МОРФОМЕТРИИ, ИЗУЧАЮЩИЙ

1) пропорции тела человека

2) размеры, площади и объемы различных структур тканей

3) окраску структур тканей

4) размеры органов


^ 5. КАРИОЦИТОМЕТРИЯ – РАЗДЕЛ МОРФОМЕТРИИ, ИЗУЧАЮЩИЙ

1) размерные характеристики органов

2) количественные характеристики тканей

3) количественные характеристики ядра и клетки

4) пропорции тела


^ 6. УЛЬТРАСТРУКТУРОМЕТРИЯ ИЗУЧАЕТ

1) количественные характеристики компонентов клетки и ядра

2) количественные характеристики тканей

3) пропорции тела

4) размеры органов


^ 7. ОСНОВНЫЕ ПАРАМЕТРЫ, ПОЛУЧАЕМЫЕ ПРИ МОРФОМЕТРИИ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ

1) линейные размеры объекта, площадь, объем объектов, их соотношение .

2) оценка интенсивности окраски

3) линейные размеры объектов

4) соотношение объектов


^ 8. ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ РАНЕЕ СРЕДСТВА ДЛЯ МОРФОМЕТРИИ

1) световой поток

2) линейки и сетки Автандилова

3) таблицы

4) калькулятор


^ 9. ОСНОВОПОЛОЖНИКОМ БИОМЕТРИИ ЯВЛЯЕТСЯ

1) Р. Гук

2) Ф. Гальтон

3) Ч. Дарвин

4) Г. Автандилов


10. КОМПЬЮТЕРНЫЕ ПРОГРАММЫ, ДОСТУПНЫЕ ДЛЯ МОРФОМЕТРИИ

1) JMicro Vision, ImageJ

2) Offic Scan

3) Cellula

4) Vision

^ 5.2. Основные понятия и положения темы.

Доказательная медицина (англ. Evidence-based medicine — медицина, основанная на доказательствах) — подход к медицинской практике, при котором решения о применении профилактических, диагностических и лечебных мероприятий принимаются исходя из имеющихся доказательств их эффективности и безопасности, а такие доказательства подвергаются поиску, сравнению, обобщению и широкому распространению для использования в интересах больных (Evidence Based Medicine Working Group, 1993).

Неотъемлемой частью доказательной медицины и современной научной деятельности является фиксация информации о состоянии биологических объектов при воздействии на них тех или иных факторов. В качестве биологического объекта выступают как экспериментальные животные, на которых апробируют модели различных патологий и способов их лечения, так и пациенты, для подтверждения – действительно ли эффективен применяемый способ профилактики или лечения.

Одним из способов изучения биологических объектов является морфологическое исследование с помощью световой микроскопии.

Биометрия – это наука, занимающаяся математическим анализом объективно учтенных групповых свойств биологических объектов.

Учитывая единство функции и структуры, для удобства изучения физиологических и морфологических признаков в биометрии можно выделить два раздела: физиометрию – науку, изучающую групповые функциональные особенности организма, и морфометрию – науку, основной задачей которой является исследование групповых свойств структур и их связей.

Таким образом, биологическую морфометрию можно определить как науку, занимающуюся математическим анализом групповых свойств объективно учтенных структур и их связей в организме экспериментальных животных и человека.

^ Цель морфометрии – максимальная объективизация изучения качественных и количественных структурных проявлений физиологических и патологических процессов, нозологических единиц, их патогенеза, морфогенеза, танатогенеза, а также исключение погрешностей измерений и, насколько это возможно, субъективизма исследователя. Полученные на этой основе числовые данные используют для представления изучаемых явлений в виде математических моделей, на основе которых устанавливают закономерности и законы.

^ Задачи морфометрии:

1. Разработка методов измерений структур организма на различных уровнях его структурной организации.

2. Математический анализ групповых свойств и связей между структурами организма на различных уровнях его структурной организации.

3. Теоретическое обобщение полученных данных в виде сформулированного закона.

^ Предмет изучения морфометрии в медико-биологическом аспекте – морфологическая основа нормальных и патологических процессов, синдромов, их интеграция в сложной системе организма, морфология нозологических форм болезней, их осложнений и исходов на основе системного подхода.

Измеряемые признаки могут быть качественными и количественными.

^ Качественные признаки не поддаются непосредственному измерению и учитываются по наличию их свойств у отдельных членов изучаемой группы. Это – цвет, консистенция, форма, пол и т.п. В таких случаях подсчитывают количество объектов имеющих те или иные учитываемые качественные признаки.

^ Количественные признаки выражаются при помощи счета или меры.

Счетные признаки получают путем подсчета количества морфологических структур и выражаются целыми числами.

^ Мерные признаки получают путем сравнения с каким-либо эталоном и выражают в единицах этого эталона.

В процессе измерений могут происходить различного рода ошибки измерений или, как их правильнее называть, погрешности измерений.

^ Погрешность измерения – отклонение результата измерения от истинного (действительного) значения измеряемой величины.

Погрешности измерений по причине возникновения бывают: инструментальные, метода измерения, субъективные, из-за изменений условий измерения.

^ Инструментальные погрешности – составляющая погрешности измерения, обусловленная погрешностью применяемого средства измерений и вызываются несовершенством принципа действия, неточностью градуировки шкалы, ненаглядностью прибора.

^ Погрешность метода измерения – составляющая систематической погрешности измерений, обусловленная несовершенством принятого метода измерений. Вследствие упрощений, принятых в уравнениях для измерений, нередко возникают существенные погрешности, для компенсации, действия которых следует вводить поправки. Погрешность метода иногда называют теоретической погрешностью. Иногда погрешность метода может проявляться как случайная.

^ Субъективная погрешность измерения – составляющая систематической погрешности измерений, обусловленная индивидуальными особенностями оператора: степенью внимательности, сосредоточенности, подготовленности и другими качествами оператора

^ Погрешность из-за изменений условий измерения –составляющая систематической погрешности измерения, являющаяся следствием неучтенного влияния отклонения в одну сторону какого-либо из параметров, характеризующих условия измерений, от установленного значения. Возникает в случае неучтенного или недостаточно учтенного действия той или иной влияющей величины (температуры, атмосферного давления, влажности воздуха, напряженности магнитного поля, вибрации и др.); неправильной установки средств измерений, нарушения правил их взаимного расположения и др.

^ По характеру проявления погрешности измерений бывают: случайные, систематические, прогрессирующие, грубые погрешности (промахи).

Случайная погрешность — погрешность, меняющаяся по величине и по знаку от измерения к измерению. Случайные погрешности могут быть связаны с несовершенством приборов, вибрацией в городских условиях, с несовершенством объекта измерений, с особенностями самой измеряемой величины.

^ Систематическая погрешность – составляющая погрешности результата измерения, остающаяся постоянной или закономерно изменяющаяся при повторных измерениях одной и той же физической величины. В зависимости от характера измерения систематические погрешности подразделяют на постоянные, прогрессивные, периодические и погрешности, изменяющиеся по сложному закону. Постоянные погрешности – погрешности, которые длительное время сохраняют свое значение, например, в течение времени выполнения всего ряда измерений. Они встречаются наиболее часто. Прогрессивные погрешности – непрерывно возрастающие или убывающие погрешности. К ним относятся, например, погрешности вследствие износа измерительных наконечников, контактирующих с деталью при контроле ее прибором активного контроля. Периодические погрешности – погрешности, значение которых является периодической функцией времени или перемещения указателя измерительного прибора. Погрешности, изменяющиеся по сложному закону, происходят вследствие совместного действия нескольких систематических погрешностей.

^ Прогрессирующая (дрейфовая) погрешность — непредсказуемая погрешность, медленно меняющаяся во времени. Она представляет собой нестационарный случайный процесс.

^ Грубая погрешность (промах) — погрешность, возникшая вследствие недосмотра экспериментатора или неисправности аппаратуры.

По представлению погрешности измерения бывают: абсолютные, относительные и приведенные

^ Абсолютная погрешность – является оценкой абсолютной ошибки измерения. Величина этой погрешности зависит от способа её вычисления, который, в свою очередь, определяется распределением случайной величины. Абсолютная погрешность измеряется в тех же единицах измерения, что и сама величина.

^ Относительная погрешность — погрешность измерения, выраженная отношением абсолютной погрешности измерения к действительному или измеренному значению измеряемой величины. Относительная погрешность является безразмерной величиной, либо измеряется в процентах.

^ Приведённая погрешность — погрешность, выраженная отношением абсолютной погрешности средства измерений к условно принятому значению величины, постоянному во всем диапазоне измерений или в части диапазона. Приведённая погрешность является безразмерной величиной, либо измеряется в процентах.

В медицинских и биологических науках морфометрия включает в себя следующие разделы: соматометрию, органометрию, гистометрию, кариоцитометрию, ультраструктурометрию.

Соматометрия – совокупность методов, используемых для определения размеров и формы тела животных или человека и отдельных его частей.

Органометрия – совокупность методов количественной оценки размеров, массы, консистенции, цвета и других параметров органов.

Гистометрия – совокупность методов количественной оценки размеров, площади и объема различных структур тканей.

Кариоцитометрия – совокупность методов измерения размеров, площади и объема клеток и их ядер.

Ультраструктурометрия – совокупность методов измерения размеров, площади, объема и количества компонентов клетки и ядра.

^ 5.3. Самостоятельная работа по теме:

Обучающий должен ознакомиться с текстом учебных пособий, лекций и продемонстрировать следующие умения:

№ п/п

Название практических умений

1

Дать определение морфометрии.

2

Классифицировать морфометрию по содержанию на разделы.

3

Использовать линейку Автандилова для получения линейных размеров изучаемых объектов.

4

Использовать разные виды сетки Автандилова для расчета площади, объема изучаемых объектов и их соотношения.


^ 5.4. Итоговый контроль знаний:

- ответы на вопросы по теме занятия:

1.Дать понятие «биометрия».

2.Дать понятие «морфометрия».

  1. .Какие признаки могут быть измерены при морфометрии?

  2. Дать понятие «погрешность измерения».

  3. Какие погрешности выделяют по причине возникновения?

  4. Какие погрешности выделяют по характеру проявления?

  5. Какие погрешности выделяют по представлению?

  6. Охарактеризовать разделы морфометрии.

  7. Какие условия необходимо соблюсти при морфометрии, для сохранения достоверности исследования?

  8. Какие параметры измеряют при морфометрии?


- решение ситуационных задач:

Задача №1.

При проведении морфометрии гистологических срезов спинного мозга необходимо рассчитать количественное соотношение клеток нейронального ряда и макроглии.

1. Как называется раздел морфометрии, содержанием которого являются названные расчеты?

2. Что можно использовать для указанных расчетов?

3. Какая компьютерная программа может быть использована?


Задача №2.

В исследовательской работе при микроскопии гистологического препарата печени требуется проведение морфометрии.

1.Какие параметры гепатоцитов можно получить?

2.Какие еще расчеты могут быть сделаны?


^ 6. Домашнее задание для уяснения темы занятия (ответить на контрольные вопросы и тестовые задания, решить ситуационные задачи по теме «Морфометрия гистологических препаратов: подсчет удельной плотности паренхимы, стромы в органах, подсчет разных видов клеток», см. методические указания для обучающихся № 16 к внеаудиторной работе).

^ 7. Рекомендации по выполнению НИРС, в том числе список тем, предлагаемых кафедрой.

Подготовить рефераты на темы:

1.Место биометрии в современных исследованиях.

2.Принципы и методология стереометрии.

3.История биометрии – от древности до наших дней.


1. Занятие № 16

1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11

Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:

Похожие:

Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям для специальности 060101 Лечебное дело (очная форма обучения) Красноярск 2013 icon Сборник методических указаний для обучающихся к внеаудиторной (самостоятельной) работе для специальности

Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям для специальности 060101 Лечебное дело (очная форма обучения) Красноярск 2013 icon Ик методических указаний для обучающихся к практическим занятиям по дисциплине «Антропология» для

Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям для специальности 060101 Лечебное дело (очная форма обучения) Красноярск 2013 icon Учебной работе д м. н., проф. С. Ю. Никулина 2012 г. Перечень вопросов к экзамену по дисциплине «Анатомия»

Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям для специальности 060101 Лечебное дело (очная форма обучения) Красноярск 2013 icon Форма освоения основной профессиональной образовательной программы по специальности 060101 Лечебное

Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям для специальности 060101 Лечебное дело (очная форма обучения) Красноярск 2013 icon Ика внутренних болезней тестовый контроль с эталонами ответов для студентов 3-го курса, обучающихся
«Красноярский государственный медицинский университет им проф. В. Ф. Войно-Ясенецкого Министерства...
Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям для специальности 060101 Лечебное дело (очная форма обучения) Красноярск 2013 icon Методические указания к практическим занятиям для студентов медицинского факультета специальности

Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям для специальности 060101 Лечебное дело (очная форма обучения) Красноярск 2013 icon Программа по микробиологии для обучения студентов лечебного факультета и факультета спортивной медицины

Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям для специальности 060101 Лечебное дело (очная форма обучения) Красноярск 2013 icon Учебно-методическое пособие по дисциплине «пропедевтика внутренних болезней, лучевая диагностика»

Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям для специальности 060101 Лечебное дело (очная форма обучения) Красноярск 2013 icon В. В. Иванова Патология сборник ситуационных задач с эталонами ответов для студентов 2-3 курсов,
Патология: сборник ситуационных задач с эталонами ответов для студентов 2-3 курсов, обучающихся по...
Сборник методических указаний для обучающихся к практическим занятиям для специальности 060101 Лечебное дело (очная форма обучения) Красноярск 2013 icon Сборник тестовых заданий с эталонами ответов для студентов 6 курса, обучающихся по специальности
Патофизиология: сборник тестовых заданий с эталонами ответов для студентов 6 курса, обучающихся по...
Разместите кнопку на своём сайте:
Медицина


База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
Документы